公开(公告)号：CN109884163A

公开(公告)日：2019-06-14

申请号：CN201910177711.9

申请日：2019-03-10

Applicant: 复旦大学

Inventor： 胡亚君 ,  金红 ,  杨芃原

IPC: G01N27/62 ,  C12P21/06

Abstract: 本发明属蛋白质分析技术领域，具体为一种外膜蛋白酶T酶解组蛋白并进行质谱分析的方法。本发明方法包括：从细胞或组织样本中采用酸提法抽提核心组蛋白，超滤纯化组蛋白后与外膜蛋白酶T进行特定条件下的孵育酶解，最后将酶解完成的肽段经过除盐处理，送入液相色谱-质谱鉴定和定量翻译后修饰。本发明方法操作方便，步骤简单，避免了传统组蛋白分析中的衍生化步骤，可实现对组蛋白翻译后修饰的精确鉴定和定量。

公开(公告)号：CN105693816A

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201610151772.4

申请日：2016-03-17

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈佳佳 ,  胡亚君 ,  徐莹 ,  金红 ,  杨芃原

IPC: C07K1/22 ,  G01N27/62

CPC classification number: C07K1/22 ,  G01N33/6848

Abstract: 本发明属蛋白质分析技术领域，具体为一种二/三甲基化（Kme2/3）修饰肽段富集和质谱分析的方法。本发明方法包括：对蛋白上未修饰（Kme0）或者单甲基化（Kme1）修饰的赖氨酸进行衍生化使其带上生物素标记，再将蛋白酶解成肽段后，再加入亲和素偶联的琼脂糖微球，通过生物素和亲和素之间的高特异和高亲和作用，除去Kme0/1肽段，在上清中保留Kme2/3修饰肽段，最后利用除盐柱捕获上清中的肽段，送入质谱分析质谱分析Kme2/3修饰肽段。本发明方法首次实现对Kme2/3修饰肽段的化学富集，能显著地提高Kme2/3修饰肽段的分析质谱选择性，并且具有特异性强、重现性好、步骤简单、操作方便等特点。

公开(公告)号：CN109884163B

公开(公告)日：2021-09-17

申请号：CN201910177711.9

申请日：2019-03-10

Applicant: 复旦大学

Inventor： 胡亚君 ,  金红 ,  杨芃原

IPC: G01N27/626 ,  C12P21/06

Abstract: 本发明属蛋白质分析技术领域，具体为一种外膜蛋白酶T酶解组蛋白并进行质谱分析的方法。本发明方法包括：从细胞或组织样本中采用酸提法抽提核心组蛋白，超滤纯化组蛋白后与外膜蛋白酶T进行特定条件下的孵育酶解，最后将酶解完成的肽段经过除盐处理，送入液相色谱‑质谱鉴定和定量翻译后修饰。本发明方法操作方便，步骤简单，避免了传统组蛋白分析中的衍生化步骤，可实现对组蛋白翻译后修饰的精确鉴定和定量。