公开(公告)号：CN115343478A

公开(公告)日：2022-11-15

申请号：CN202110514734.1

申请日：2021-05-12

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李洋 ,  尹利敏 ,  李天佑 ,  张洁 ,  薛文龙 ,  林灵茜

IPC: G01N33/68 ,  C12Q1/48

Abstract: 本发明涉及的是靶向溶酶体相关的技术领域，具体的更涉及到一种靶向溶酶体的小分子化合物筛选系统。至少包括如下步骤：(1)：铺板，培养器皿中培养TFEB‑EGFP稳转细胞或EGFP‑ZKSCAN3稳转细胞至细胞密度为80‑95％；(2)：加入小分子化合物，观察TFEB‑EGFP稳转细胞或EGFP‑ZKSCAN3稳转细胞，统计TFEB‑EGFP的入核率或EGFP‑ZKSCAN3的出核率，筛选出TFEB‑EGFP的入核率达到50％以上和/或EGFP‑ZKSCAN3的出核率达到50％以上的阳性小分子化合物；(3)：用溶酶体特异性探针进一步验证，筛选出能促进溶酶体生成的阳性小分子化合物；(4)：找出阳性小分子化合物的靶蛋白；(5)：分析阳性小分子化合物的靶蛋白参与的信号通路及分子机制；(6)：作用于TFEB的靶蛋白激酶或者中间间接蛋白激酶的活性发生改变的检测；(7)：检测阳性小分子化合物促进溶酶体生成后的降解功能。