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公开(公告)号：CN106153941B
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201510210651.8
申请日：2015-04-28
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/574 , G01N27/62
Abstract: 本发明属生化分析领域，涉及一种基于制备的蛋白质棕榈酰化修饰泛抗体血清以及利用含该泛抗体血清对复杂生物样本中棕榈酰化修饰蛋白质的高通量检测方法，本方法中采用棕榈酰化修饰的肽段作为抗原，制备特异性强的棕榈酰化修饰泛抗血清，利用该特异抗血清对蛋白质棕榈酰化修饰状态进行检测，该方法相比现有的通量分析方法具有特异性强的优点，假阳性率低，能够直接指示棕榈酰化修饰蛋白质，能用于各种来源的样本，结合质谱分析，能高通量地鉴定生物样本中棕榈酰化修饰的蛋白质，具有简便易行的可操作性。本发明为高通量检测生物样本中蛋白质棕榈酰化修饰提供了有效的手段。
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公开(公告)号：CN109991422A
公开(公告)日：2019-07-09
申请号：CN201711499280.5
申请日：2017-12-29
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属生化分析领域，涉及一种新的基于特异抗血清的棕榈酰化修饰蛋白质的检测方法，本方法中将棕榈酰化修饰的短肽(Cys‑Acp‑Cys(Pal))偶联到载体蛋白质上作为抗原，制备出抗蛋白质棕榈酰化修饰的泛抗血清，并利用该抗血清特异性地分析生物样品中蛋白质的棕榈酰化修饰状态。本发明制得的泛抗血清特异性更好，效价更高；本方法能利用抗血清的特异性直接指示各类复杂样品中如细胞、体液或组织样本的棕榈酰化修饰蛋白质，假阳性率低，结合色谱‑质谱分析，可实现生物样本中棕榈酰化修饰蛋白质的高通量鉴定分析，操作简便、易行。本发明为高通量检测生物样本中蛋白质棕榈酰化修饰提供了有效的手段。
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公开(公告)号：CN106153941A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201510210651.8
申请日：2015-04-28
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/574 , G01N27/62
Abstract: 本发明属生化分析领域，涉及一种基于制备的蛋白质棕榈酰化修饰泛抗体血清以及利用含该泛抗体血清对复杂生物样本中棕榈酰化修饰蛋白质的高通量检测方法，本方法中采用棕榈酰化修饰的肽段作为抗原，制备特异性强的棕榈酰化修饰泛抗血清，利用该特异抗血清对蛋白质棕榈酰化修饰状态进行检测，该方法相比现有的通量分析方法具有特异性强的优点，假阳性率低，能够直接指示棕榈酰化修饰蛋白质，能用于各种来源的样本，结合质谱分析，能高通量地鉴定生物样本中棕榈酰化修饰的蛋白质，具有简便易行的可操作性。本发明为高通量检测生物样本中蛋白质棕榈酰化修饰提供了有效的手段。
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公开(公告)号：CN115677820A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110866821.3
申请日：2021-07-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析技术领域，涉及一种基于噻唑烷化学可逆反应富集早期糖化肽段的方法。本发明采用Boc‑Cys(Trt)‑NHS在ACN和DIEA的反应体系中合成了一种1,2‑氨基硫醇磁性纳米材料Fe3O4@PGMA‑DETA‑Cys，结合噻唑烷可逆反应用于高效快速地富集早期糖化肽段。富集偶联体系为：5mM TCEP的10mM醋酸铵溶液，50％ACN,50％H2O；解离体系为：氯化烯丙基钯二聚物、TCEP和MPAA，比例为4：2：1，6M Gnd.HCl，PH 5～9。该富集方法具有选择性好(糖化肽段/非糖化肽段的摩尔比为1：100)、灵敏度高(富集检测限为1fmol/μL)、分离快速、操作简单等优点，能用于分析实际生物样品中的糖化肽段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106468632B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201510501150.5
申请日：2015-08-16
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生化分析领域，涉及一种磁性纳米材料及其制备方法和在用于富集棕榈酰化修饰蛋白质和/或肽段的方法中的用途。本发明采用纳米Fe3O4磁核作为材料磁性中心，将3‑(2‑吡啶二巯基)丙酸N‑羟基琥珀酰亚胺酯SPDP直接包裹在Fe3O4@NH2上，制得Fe3O4@NH2@SPDP磁性纳米材料：该磁性纳米材料能选择性地提高富集棕榈酰化修饰蛋白质和/或肽段的效率，并能用于分析实际生物样本。本发明的磁性纳米材料具有选择性好，灵敏度高，制备简单，分离快速方便等优点，基于所述磁性纳米材料的富集方法具有操作简单、省时经济、高效灵敏的特点。
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公开(公告)号：CN110687297B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN201810748598.0
申请日：2018-07-06
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属于生物分析技术领域，涉及一种基于稳定同位素半胱氨酸代谢标记的棕榈酰化修饰蛋白质定量分析方法。本发明采用含重标稳定同位素半胱氨酸的培养基培养细胞，使细胞蛋白质中的半胱氨酸被重标半胱氨酸完全替代，将不同细胞分别培养在含轻、重标半胱氨酸的培养基中，蛋白质提取混合，采用固相载体选择性富集，色谱‑质谱分离分析后，可定量分析不同细胞中的棕榈酰化修饰蛋白质。与现有的定量分析方法相比，本方法可减少因繁冗的并行操作带来的误差，以及减少样本的复杂性，简化谱图；促进低丰度蛋白的准确定量；可用于定量分析包括C末端肽段在内的所有潜在的棕榈酰化修饰位点，本方法适用于所有的细胞样品。
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公开(公告)号：CN116413367A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202111652606.X
申请日：2021-12-30
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析技术领域，涉及一种高通量分析生物体内完整S‑棕榈酰化修饰蛋白质组的方法及其应用。本发明利用氟化石墨材料为固相载体，通过两次富集策略，建立生物样本中完整S‑棕榈酰化修饰肽段的选择性分离方法；通过改变样品溶解液中的乙腈浓度实现组合溶样分析，提高色谱进样时S‑棕榈酰化修饰肽段的回收率；通过优化的色谱淋洗梯度和数据库检索参数的设置，建立高通量的完整S‑棕榈酰化修饰肽段的质谱分析方法。本方法可大规模地分析鉴定生物样本中S‑棕榈酰化修饰蛋白质，同时得到修饰位点及其修饰基团的信息。本发明方法可靠性高，提供的信息丰富。
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公开(公告)号：CN106468632A
公开(公告)日：2017-03-01
申请号：CN201510501150.5
申请日：2015-08-16
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生化分析领域，涉及一种磁性纳米材料及其制备方法和在用于富集棕榈酰化修饰蛋白质/肽段的方法中的用途。本发明采用合成的纳米Fe3O4磁核作为材料磁性中心，将3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)包裹Fe3O4磁核，制得Fe3O4@NH2@SPDP磁性纳米材料：该磁性纳米材料能选择性地提高富集棕榈酰化修饰肽段/蛋白的效率，并能用于分析实际生物样本。本发明的磁性纳米材料具有选择性好，灵敏度高，制备简单，分离快速方便等优点，基于所述磁性纳米材料的富集方法具有操作简单、省时经济、高效灵敏的特点。
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公开(公告)号：CN110687297A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201810748598.0
申请日：2018-07-06
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属于生物分析技术领域，涉及一种基于稳定同位素半胱氨酸代谢标记的棕榈酰化修饰蛋白质定量分析方法。本发明采用含重标稳定同位素半胱氨酸的培养基培养细胞，使细胞蛋白质中的半胱氨酸被重标半胱氨酸完全替代，将不同细胞分别培养在含轻、重标半胱氨酸的培养基中，蛋白质提取混合，采用固相载体选择性富集，色谱-质谱分离分析后，可定量分析不同细胞中的棕榈酰化修饰蛋白质。与现有的定量分析方法相比，本方法可减少因繁冗的并行操作带来的误差，以及减少样本的复杂性，简化谱图；促进低丰度蛋白的准确定量；可用于定量分析包括C末端肽段在内的所有潜在的棕榈酰化修饰位点，本方法适用于所有的细胞样品。
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