环介导切刻等温-CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN112921119B

    公开(公告)日:2024-01-23

    申请号:CN202110206812.1

    申请日:2021-02-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及环介导切刻等温‑CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法。本发明对裂谷热病毒S基因中一个片段的设计了5条引物,并利用链置换Bst DNA聚合酶以及特殊发卡引物在恒温条件下构造特异性扩增元件,实现核酸指数扩增;利用切刻酶切刻活性和Bst DNA聚合酶链置换活性生成大量单链片段。再利用Cas12a蛋白和向导RNA形成的二元复合体的模板依赖顺式切割活性介导的反式切割活性进行检测,快速、高效和准确;该技术对裂谷热病毒的检测灵敏度高、操作简便,成本低,可以和胶体金试纸偶联实现快速实时检测,可以很好补充裂谷热病毒快速检测的方案。

    一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113046453B

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110312647.8

    申请日:2021-03-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段,然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起,构造双茎环扩增元件进行指数扩增,达到信号的指数放大。其中,锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针,将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端,可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测,信号明显,实现了双链点突变的快速检测,且具有很高的灵敏度和准确性,给与临床指导用药带来益处。

    一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113046453A

    公开(公告)日:2021-06-29

    申请号:CN202110312647.8

    申请日:2021-03-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段,然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起,构造双茎环扩增元件进行指数扩增,达到信号的指数放大。其中,锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针,将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端,可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测,信号明显,实现了双链点突变的快速检测,且具有很高的灵敏度和准确性,给与临床指导用药带来益处。

    免疫检测病毒用纳米磁性微球材料及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114924067B

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202210399441.8

    申请日:2022-04-15

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于免疫检测病毒技术领域,具体为一种免疫检测病毒用纳米磁性微球材料及其制备方法。本发明的纳米磁性微球材料包括纳米二氧化硅磁珠、包被在纳米二氧化硅磁珠表面的具有结合病毒能力的一种或者多种材料。该纳米磁性微球材料用于免疫法检测液体样本中病毒,包括将修饰官能团和包覆一种或者多种材料的纳米二氧化硅磁珠富集液体样本中的病毒;用抗病毒表面结合位点的一抗进行免疫反应;对磁珠进行封闭;用含有异硫氰酸荧光素标记或辣根过氧化物酶标记的二抗与一抗结合;通过荧光显色或者化学发光法对液体样本中病毒的含量进行表征。本发明解决了液体样本中病毒载量较少而不易被聚合酶链式反应法检出的情况。

    一种基于核酸恒温扩增的日本脑炎病毒检测试剂盒

    公开(公告)号:CN116179767A

    公开(公告)日:2023-05-30

    申请号:CN202310264270.2

    申请日:2023-03-19

    Abstract: 本发明用于生物检测技术领域,具体为一种基于核酸恒温扩增的日本脑炎检测试剂盒。本发明检测试剂盒包括引物组、扩增反应试剂、阳性质控以及阴性对照;引物组根据NCBI中日本脑炎病毒基因组包膜蛋白E基因片段SEQ ID NO.5设计,为SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.4所示;阳性对照为日本脑炎病毒假病毒,阴性对照为无核酸酶水。本发明利用链置换Bst DNA聚合酶和Mulv逆转录酶以及特殊发卡引物在恒温条件下构造特异性扩增元件,利用UDG酶去除气溶胶污染,实现核酸指数扩增,保证扩增的高度灵敏度和快速性。本发明检测试剂盒对日本脑炎病毒的检测灵敏度高、操作简便,成本低,假阳性率低,并大大提高日本脑炎病毒的检测速度。

    免疫检测病毒用纳米磁性微球材料及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114924067A

    公开(公告)日:2022-08-19

    申请号:CN202210399441.8

    申请日:2022-04-15

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于免疫检测病毒技术领域,具体为一种免疫检测病毒用纳米磁性微球材料及其制备方法。本发明的纳米磁性微球材料包括纳米二氧化硅磁珠、包被在纳米二氧化硅磁珠表面的具有结合病毒能力的一种或者多种材料。该纳米磁性微球材料用于免疫法检测液体样本中病毒,包括将修饰官能团和包覆一种或者多种材料的纳米二氧化硅磁珠富集液体样本中的病毒;用抗病毒表面结合位点的一抗进行免疫反应;对磁珠进行封闭;用含有异硫氰酸荧光素标记或辣根过氧化物酶标记的二抗与一抗结合;通过荧光显色或者化学发光法对液体样本中病毒的含量进行表征。本发明解决了液体样本中病毒载量较少而不易被聚合酶链式反应法检出的情况。

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