公开(公告)号：CN108285919A

公开(公告)日：2018-07-17

申请号：CN201710015023.3

申请日：2017-01-09

Applicant: 复旦大学

Inventor： 蔡启良 ,  干劲 ,  朱彩霞

IPC: C12Q1/37 ,  C12N9/50 ,  C12N15/57

Abstract: 本发明属生物化学与分子生物学领域，具体涉及一种蛋白体外泛素化修饰快速检测试剂盒，尤其是克隆和原核表达泛素化修饰系统的E1，E2与泛素分子，以及应用于人源蛋白体外泛素化修饰验证。本发明中使用大肠杆菌原核表达并纯化泛素化E1酶Uba1，E2酶Ubc5a和泛素分子GST-ubiquitin，在合适的反应缓冲液、时间、温度和蛋白浓度配比下，可以对特定的泛素E3连接酶或是蛋白底物进行体外泛素化修饰。该试剂盒可以方便、准确地鉴定底物蛋白是否具有泛素化修饰，能被广范围应用于泛素化验证实验。

公开(公告)号：CN108285918A

公开(公告)日：2018-07-17

申请号：CN201710014909.6

申请日：2017-01-09

Applicant: 复旦大学

Inventor： 蔡启良 ,  干劲 ,  朱彩霞

IPC: C12Q1/37 ,  C12N9/50 ,  C12N15/57

Abstract: 本发明属生物化学与分子生物学领域，涉及蛋白体外SUMO化修饰快速检测试剂盒，尤其涉及克隆和原核表达SUMO化修饰系统的E1，E2，E3以及SUMO-1和SUMO-2分子，以及应用于人源蛋白体外SUMO化修饰验证。本发明中使用大肠杆菌原核表达并纯化SUMO化E1酶AOS-Uba1，E2酶Ubc9，E3酶KAP1以及SUMO-1和SUMO-2分子，在合适的反应缓冲液、时间、温度和蛋白浓度配比下，对特定的SUMO E3连接酶或是蛋白底物进行体外SUMO化修饰。该试剂盒可以方便、准确地鉴定底物蛋白是否具有SUMO化修饰，能被广范围应用于SUMO化修饰验证实验。