公开(公告)号：CN116165290A

公开(公告)日：2023-05-26

申请号：CN202211635816.2

申请日：2022-12-19

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李嫣 ,  冯嘉楠 ,  姜琳琳 ,  曹浩 ,  向阳佳一

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/08

Abstract: 本发明属于分析化学技术领域，具体为抗体药物研发流程中工程细胞株的筛选方法。本发明利用固定有特定配体/受体的磁珠，对工程细胞发酵液进行一步纯化，特异性地提取与特定配体/受体亲和力较强的抗体组分，在纯化的同时摒弃亲和力差的抗体，测定不同工程细胞株对于高质量抗体的表达量；利用SEC对提取的强亲和力抗体组分进行蛋白聚集度的分析；抗体表达量高、亲和力强、聚集度低的样品直接体现为SEC色谱图上较高的单体峰，依据单体峰面积数值评估对应的工程细胞株，从大量工程细胞株中快速筛选出有开发潜力的细胞株。本发明与传统的工程细胞株筛选模式相比，显著缩短了分析时间，降低了分析成本。

公开(公告)号：CN116265488A

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202111551939.3

申请日：2021-12-17

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李嫣 ,  冯嘉楠 ,  姜琳琳 ,  曹宜青

IPC: C07K17/14 ,  C07K17/08 ,  C08G81/00

Abstract: 本发明提供了一种将Fc受体蛋白高载量且高活性地固定于磁珠表面的方法，即将聚酰胺‑胺型树枝状高分子(PAMAM dendrimer)固定于聚多巴胺包覆的磁性微球表面，利用其树枝结构为材料提供较大的比表面积和较多的蛋白结合位点，通过化学键合的方式将链霉亲和素大量固定于PAMAM包覆的材料表面，再利用链霉亲和素与生物素之间的高特异性亲和力，将生物素标记的Fc受体蛋白固定于整个磁珠的外表面。本方法通过使用亲和固定方式、添加表面活性剂稳定受体蛋白结构等，克服了传统路线中易发生Fc受体蛋白失活的问题，制得的固定化Fc受体蛋白磁珠具有更优异的选择性和结合活性。