公开(公告)号：CN1296475C

公开(公告)日：2007-01-24

申请号：CN200510062600.1

申请日：2005-03-28

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 曾润颖 ,  林念炜

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/52

Abstract: 一种碱性低温蛋白酶及其制备方法，涉及一种细菌和从细菌得到的蛋白酶。提供一种从南极深海泥样获得并经分离成为纯培养物的菌株海杆菌属R2、从R2菌株得到的碱性低温蛋白酶及其制备方法。保藏编号为CCTCC NO：M205002。其步骤为粗酶液制备：将菌株R2活化后接于培养基，培养至指数生长期，再转接于培养基中，加氨苄青霉素和天冬酰胺，培养，发酵，离心；粗酶液加硫酸铵离心取上清，离心取沉淀，在缓冲液中透析；酶液离心，冷冻干燥，再上样洗脱，收集酶活性部分冷冻干燥；重溶于缓冲液中并透析，上样洗脱，合并活性部分，冷冻干燥；样品溶于缓冲液中并透析分离纯化，收集有活力部分冷冻干燥，即为纯酶。

公开(公告)号：CN1670187A

公开(公告)日：2005-09-21

申请号：CN200510062600.1

申请日：2005-03-28

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 曾润颖 ,  林念炜

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/52

Abstract: 一种碱性低温蛋白酶及其制备方法，涉及一种细菌和从细菌得到的蛋白酶。提供一种从南极深海泥样获得并经分离成为纯培养物的菌株海杆菌属R2、从R2菌株得到的碱性低温蛋白酶及其制备方法。保藏编号为CCTCCNO：M205002。其步骤为粗酶液制备：将菌株R2活化后接于培养基，培养至指数生长期，再转接于培养基中，加氨苄青霉素和天冬酰胺，培养，发酵，离心；粗酶液加硫酸铵离心取上清，离心取沉淀，在缓冲液中透析；酶液离心，冷冻干燥，再上样洗脱，收集酶活性部分冷冻干燥；重溶于缓冲液中并透析，上样洗脱，合并活性部分，冷冻干燥；样品溶于缓冲液中并透析分离纯化，收集有活力部分冷冻干燥，即为纯酶。