公开(公告)号：CN103436511B

公开(公告)日：2015-03-04

申请号：CN201310268933.4

申请日：2013-06-28

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 曾润颖 ,  徐辉

IPC: C12N9/52 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70

Abstract: 一种高温碱性蛋白酶及其制备方法，涉及蛋白酶。提供一种高温碱性蛋白酶Fppro1及制备方法，以及高温碱性蛋白酶基因Fppro1。高温碱性蛋白酶Fppro1的生产菌株为太平洋火色杆菌Flammeovirga Pacifica H2。制备时，克隆高温碱性蛋白酶基因Fppro1，将其插入表达载体，构建携带高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体；将高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中，选取阳性克隆于培养基中培养；离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞，重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中，将裂解后的悬液离心，收集上清液，再与Ni－NTA Agarose混匀，纯化。

公开(公告)号：CN103436511A

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201310268933.4

申请日：2013-06-28

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 曾润颖 ,  徐辉

IPC: C12N9/52 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70

Abstract: 一种高温碱性蛋白酶及其制备方法，涉及蛋白酶。提供一种高温碱性蛋白酶Fppro1及制备方法，以及高温碱性蛋白酶基因Fppro1。高温碱性蛋白酶Fppro1的生产菌株为太平洋火色杆菌Flammeovirga Pacifica H2。制备时，克隆高温碱性蛋白酶基因Fppro1，将其插入表达载体，构建携带高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体；将高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中，选取阳性克隆于培养基中培养；离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞，重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中，将裂解后的悬液离心，收集上清液，再与Ni－NTA Agarose混匀，纯化。