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公开(公告)号：CN104328161A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410520947.5
申请日：2014-09-29
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明涉及一种直观筛选抑制黄曲霉毒素的微生物菌种的方法，首先制备适宜海洋微生物、陆地微生物、或植物内生菌等各类微生物生长的固体培养基平板，在平板四周点接接种4个不同的微生物菌种，在25-35度恒温培养箱中培养0-2天后，再在平板中央接种寄生曲霉DM菌株，继续培养3-4天后，眼睛直接观察平板中DM菌株的菌丝生长和橘红色降散盘衣酸的产生情况，凡是能抑制DM菌株菌丝中橘红色降散盘衣酸的产生和/或菌丝生长的微生物菌种，即是能抑制黄曲霉毒素产生的微生物菌种。该发明是一种直观、快速、安全、低成本筛选高效抑制黄曲霉毒素的微生物菌种的方法。
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公开(公告)号：CN106519023A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610410714.9
申请日：2016-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
CPC classification number: C07K14/825 , C12N15/66 , C12N15/70 , C12P21/02
Abstract: 本发明提供了一种嗜冷酵母金属硫蛋白的基因克隆、表达方法及应用。通过提取该金属硫蛋白基因，设计引物F1、R1，经PCR扩增后与表达载体进行连接，构建重组表达载体；将重组表达载体转化入表达菌株，构建重组表达转化体；建立了该重组蛋白的表达与纯化方法。所述金属硫蛋白基因，其核苷酸序列及编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明克隆获得的新型金属硫蛋白，含有16个半胱氨酸，丰富的巯基能够螯合多种金属重金属离子，在医药、食品保健及化妆品添加剂、基因工程试剂、化工、环保、动物、农业等领域前景广阔。
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公开(公告)号：CN102329821A
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN201110288650.7
申请日：2011-09-22
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明涉及微生物培养基和发酵工程技术领域，利用Plackett-Burman(PB)设计法和响应面优化法，提供了一种适合芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法，该方法就可显著提高抑制黄曲霉毒素产生的细菌生物活性物质的产量。该培养基配方(克/升)为：葡萄糖20-50，牛肉膏5-15，酵母粉3-12，大豆蛋白胨4-15，硫酸镁1-5，磷酸氢二钾1-5，硫酸锰0.01-0.1，高温灭菌后，以1-10％量接种，在25-35℃摇床或发酵罐中以100-200转/分钟连续培养3-6d，即可获得含有抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液，与对照相比，该发酵液对寄生曲霉真菌菌丝体生长的抑制率提高3.5-5.4倍，对黄曲霉毒素的抑制率提高2-3倍。
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公开(公告)号：CN102199645A
公开(公告)日：2011-09-28
申请号：CN201110063616.X
申请日：2011-03-09
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明属于生物制药领域，涉及嗜冷红酵母的发酵生产和所产金属硫蛋白的制备工艺。自极地嗜冷红酵母中选育出拮抗重金属、并产生金属硫蛋白的菌株，该菌在添加Cu2+的优化2216E培养液中，较低温度下培养，经细胞破壁、凝胶过滤、离子层析、脱盐和冷冻干燥得纯化的铜金属硫蛋白。该红酵母所产金属硫蛋白络合重金属离子的能力较强，并且产量为常温酵母的5-60倍。采用本发明提取金属硫蛋白纯度可达95％以上。酵母以其生物安全性高、易培养和不受时空限制而具有独特的优势，并且产生的金属硫蛋白提取工艺简单，无污染无残毒，较动物金属硫蛋白易得。在医药、食品保健及化妆品添加剂、基因工程试剂、化学、环保、动物、农业以及重金属回收等领域市场前景广阔。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113215014A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202011510102.X
申请日：2020-12-18
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海) , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明提供一株能降解黄曲霉毒素B1、具有脱毒作用的深海菌株，为玫瑰色库克菌M2PMix1‑M2Mix5‑13菌株(Kocuria rosea M2PMix1‑M2Mix5‑13)，分离自在西太平洋牛郎平顶海山的山顶1617m水深处原位定向富集培养1年的培养物，已保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.61240。将M2PMix1‑M2Mix5‑13菌株在M2培养基中发酵，发酵1天获得的发酵无细胞上清液，在37度下1天对黄曲霉毒素B1的降解率达94.01±1.45%；发酵4天获得的发酵无细胞上清液，在37度下1天对黄曲霉毒素B1的降解率达99.89±0.02%。本发明的玫瑰色库克菌M2PMix1‑M2Mix5‑13菌株及其发酵产物可用于相关粮食、饮品、饲料等污染黄曲霉毒素的去除脱毒。
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公开(公告)号：CN105039197A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510296912.2
申请日：2015-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海) , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明提供一株可抑制黄曲霉毒素合成的深海细菌，为阿氏芽孢杆菌ZL4菌株（Bacillus aryabhattai ZL4），分离自南大西洋2796米水深的浅黄色钙质软泥沉积物，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.10661。将菌株在筛选出的培养基中发酵，获得的发酵上清液可完全抑制黄曲霉毒素的合成，不会产生任何有毒中间产物，具有从毒素合成途径的源头抑制黄曲霉毒素产生的能力，但对肠道菌群和单细胞真菌酿酒酵母则无抑制作用。本发明的阿氏芽孢杆菌ZL4菌株及其发酵产物可用于饲料、粮食、大田作物等的黄曲霉毒素污染的有效防控。
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公开(公告)号：CN113215013A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202011509140.3
申请日：2020-12-18
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海) , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明提供一株不仅能降解黄曲霉毒素B1、也能抑制黄曲霉毒素合成的深海放线菌菌株，为海迪茨氏菌M2PC‑M2Mix1‑11菌株（Dietzia maris M2PC‑M2Mix1‑11），分离自在西太平洋牛郎平顶海山的山顶1617m水深处原位定向富集培养1年的培养物，已保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.61241。将M2PC‑M2Mix1‑11菌株在M2培养基中发酵2‑5天获得的发酵无细胞离心上清液，在37度下1天对黄曲霉毒素B1的降解率达90.89±0.24%，对黄曲霉毒素合成的抑制率达100%。本发明的海迪茨氏菌M2PC‑M2Mix1‑11菌株及其发酵液不仅可用于田间作物栽培、粮食储藏、食品与饮料加工、饲料生产等的抑制黄曲霉毒素的产生，而且也可用于相关粮食、饮品、饲料等已经污染黄曲霉毒素的去除脱毒。
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公开(公告)号：CN106566819B
公开(公告)日：2020-04-14
申请号：CN201610410715.3
申请日：2016-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明提供了一种低温嗜盐α—淀粉酶的基因克隆、表达及分离纯化方法。通过提取该金属硫蛋白基因，设计引物TAC‑F7、TAC‑R5，经PCR扩增后与表达载体进行连接，构建重组质粒；将重组质粒转化入表达菌株，构建重组基因工程菌；建立了该重组蛋白的表达与纯化方法。其低温嗜盐α—淀粉酶核苷酸序列及编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，其信号肽的基因和氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。该淀粉酶具有如下性质：最适温度20℃，最适pH 8.0，最适盐浓度为1M NaCl；作为一种新型的低温嗜盐酶制剂，可有效的用于食品、发酵、医药、皮革、酿造、饲料、纺织和洗涤剂等工业中。
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公开(公告)号：CN106566819A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610410715.3
申请日：2016-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明提供了一种低温嗜盐α‑淀粉酶的基因克隆、表达及应用。通过提取该金属硫蛋白基因，设计引物TAC‑F7、TAC‑R5，经PCR扩增后与表达载体进行连接，构建重组质粒；将重组质粒转化入表达菌株，构建重组基因工程菌；建立了该重组蛋白的表达与纯化方法。该低温嗜盐α‑淀粉酶核苷酸序列及编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，其信号肽的基因和氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。该淀粉酶具有如下性质：最适温度20℃，最适pH 8.0，最适盐浓度为1M NaCl；作为一种新型的低温嗜盐酶制剂，可有效的用于食品、发酵、医药、皮革、酿造、饲料、纺织和洗涤剂等工业中。
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