公开(公告)号：CN102559733A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201210065114.5

申请日：2012-03-13

Applicant: 黑龙江省科学院微生物研究所 ,  哈尔滨工业大学

Inventor： 曲晓军 ,  崔艳华 ,  张超 ,  孙建华 ,  夏海华 ,  王金英 ,  于冲

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/01

Abstract: 导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法，涉及一种导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法。是要解决目前使用大肠杆菌作为宿主表达clfA基因，研制基因工程疫苗存在侵袭性和毒性问题。方法：提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA；以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得clfA基因；提取保存于大肠杆菌JM109中的质粒pMG36c；分别对clfA基因和质粒pMG36c进行双酶切，将酶切后产物连接；将连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中，采用氯霉素筛选转化子，构建重组质粒；将重组质粒电转化乳酸乳球菌，即完成。本发明可用于研制基因工程疫苗，安全、无致病性。

公开(公告)号：CN103276058A

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201310150907.1

申请日：2013-04-26

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 崔艳华 ,  曲晓军 ,  陈章庭 ,  张超 ,  王超 ,  丁忠庆

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/01

Abstract: 一种乳酸菌IIa类抗菌肽的PCR筛选方法，涉及一种抗菌肽的筛选方法。本发明是要解决传统的抗菌肽筛选方法存在的敏感性低的技术问题。本发明的方法为：一、IIa类抗菌肽聚类分析与筛选引物设计，PCR产物的获得；二、PCR产物载体连接与测序，获得乳酸菌IIa类抗菌肽。本发明PCR筛选的抗菌肽的基因序列与enterocin A的编码基因的同源性为99％，敏感性高。本发明应用于抗菌肽的筛选领域。