公开(公告)号：CN116948990A

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202310873960.8

申请日：2023-07-17

Applicant: 哈尔滨医科大学 ,  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 王永 ,  葛金英

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/45 ,  C12N15/47 ,  C12N15/40 ,  A61K39/17 ,  A61K39/205 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种利用RNA病毒的反向遗传操作技术快速制备减毒活疫苗的方法，通过囊膜糖蛋白基因与大聚合酶蛋白基因进行位置互换，构建不分节段单股负链RNA病毒的重组减毒病毒株。以新城疫病毒Lasota株为例，利用Vero细胞系成功救获了野生型重组病毒株，成功构建并拯救了囊膜糖蛋白基因(HN或F或F和HN共同)与大聚合酶蛋白(L)基因位置互换的重组病毒；拯救的重组病毒的毒力与亲本株相比，差异极显著，可以作为无毒疫苗株应用于免疫接种实践。

公开(公告)号：CN104195154B

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201410373399.8

申请日：2014-07-31

Applicant: 哈尔滨医科大学

Inventor： 王永

IPC: C12N15/63 ,  C12N7/01 ,  A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的反向遗传操作系统及其应用，该系统包含：转录质粒，该转录质粒包括所述受控于真核启动子的新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的全基因组cDNA序列；三个受控于真核启动子的转录辅助质粒，该辅助质粒分别包括编码所述新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列、编码所述新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列以及编码所述新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列。利用本发明建立的反向遗传操作系统，成功救获了野生型重组新城疫病毒，为进一步开展以该新城疫病毒为载体的疫苗研制、肿瘤溶瘤治疗病毒以及NDV病毒相关的基础研究奠定了基础。

公开(公告)号：CN104195154A

公开(公告)日：2014-12-10

申请号：CN201410373399.8

申请日：2014-07-31

Applicant: 哈尔滨医科大学

Inventor： 王永

IPC: C12N15/63 ,  C12N7/01 ,  A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的反向遗传操作系统及其应用，该系统包含：转录质粒，该转录质粒包括所述受控于真核启动子的新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的全基因组cDNA序列；三个受控于真核启动子的转录辅助质粒，该辅助质粒分别包括编码所述新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列、编码所述新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列以及编码所述新城疫病毒Mukteswar中等毒力疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列。利用本发明建立的反向遗传操作系统，成功救获了野生型重组新城疫病毒，为进一步开展以该新城疫病毒为载体的疫苗研制、肿瘤溶瘤治疗病毒以及NDV病毒相关的基础研究奠定了基础。