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公开(公告)号：CN103397390A
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201310117912.2
申请日：2013-04-08
Applicant: 哈尔滨体育学院
Abstract: 本发明涉及优秀冰雪运动员血液cDNA文库以及其构建方法，其中利用优秀冰雪运动员血液样品作为材料，通过提取总RNA、合成双链cDNA、蛋白酶K消化、Sfi1酶切并连接入载体、λ噬菌体的包装，最终获得高滴度、高重组率、插入片段范围大的高质量优秀冰雪运动员血液cDNA文库。此发明属于体育科学、人类资源方法学、细胞生物学及分子生物学的交叉学科领域。
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公开(公告)号：CN103160586A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310108902.2
申请日：2013-04-01
Applicant: 哈尔滨体育学院
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种测定优秀冰雪运动员力量潜能的方法，可以使之应用于冰雪运动员的选材，其方法主要是通过通过测定α-辅肌动蛋白-3基因(ACTN3)上的R577X(C1747T)位点单核苷酸来进行预测的。抽取外周静脉血并提取DNA。设计PCR引物。上游引物5’-CAg CAg CATTCT CCT GTCA-3’；下游引物：5’-CCC TTA CCT CCA CCT TCg-3’。扩增ACTN3基因C1747T位点片断长度为350bp。PCR产物经Dde I内切酶酶切消化后，出现3种类型条带：有Dde I酶切位点的纯合型TT被切为47bp、97bp和206bp3条带；没有Dde I酶切位点的纯合型CC为144bp和206bp2条带；杂合型TC为47bp、97bp、144bp和206bp4条带。
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公开(公告)号：CN103160461B
公开(公告)日：2015-01-14
申请号：CN201310117896.7
申请日：2013-04-08
Applicant: 哈尔滨体育学院
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及优秀冰雪运动员骨骼肌卫星细胞体外分离培养技术，属于细胞生物学、运动创伤学、组织工程学交叉学科领域。通过采用0.9％无菌生理盐水清洗肌肉组织，37°条件下1％I型胶原酶及0.1％链酶蛋白酶联合消化分离骨骼肌卫星细胞，含10％胎牛血清高糖DMEM培养基培养以及采用冻存液DMEM基础培养基+二甲基亚砜+胎牛血清(比例为5∶1∶4)冻存骨骼肌卫星细胞，提供了一种简易、高效、传代稳定的优秀冰雪运动员骨骼肌卫星细胞体外分离培养方法。
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公开(公告)号：CN103160498A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310117899.0
申请日：2013-04-08
Applicant: 哈尔滨体育学院
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及优秀冰雪运动员血液mRNA反转录技术，属于运动生理学、运动生化学、分子生物学交叉学科领域。提供了一种冰雪运动员血液mRNA反转录改进方法，该方法在血液mRNA提取中加入氯仿-异戊醇抽提方法，并且采用改良磁珠法进行mRNA纯化，采用高盐氯化钠-柠檬酸钠盐溶液漂洗生物素标记的Oligo(dT)探针配合低盐氯化钠-柠檬酸钠盐溶液漂洗生物素标记的Oligo(dT)探针-磁珠杂交体，mRNA收集率高，纯度高。本发明较传统血液mRNA提取、反转录的方法更为省时、简易、高效。为运动相关基因进一步的研究提供了丰富的材料。
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公开(公告)号：CN103160461A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310117896.7
申请日：2013-04-08
Applicant: 哈尔滨体育学院
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及优秀冰雪运动员骨骼肌卫星细胞体外分离培养技术，属于细胞生物学、运动创伤学、组织工程学交叉学科领域。通过采用0.9％无菌生理盐水清洗肌肉组织，37°条件下1％I型胶原酶及0.1％链酶蛋白酶联合消化分离骨骼肌卫星细胞，含10％胎牛血清高糖DMEM培养基培养以及采用冻存液DMEM基础培养基+二甲基亚砜+胎牛血清(比例为5∶1∶4)冻存骨骼肌卫星细胞，提供了一种简易、高效、传代稳定的优秀冰雪运动员骨骼肌卫星细胞体外分离培养方法。
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