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公开(公告)号:CN109627282A
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201811340286.2
申请日:2018-11-12
Applicant: 吉林大学
IPC: C07K1/14 , C12N5/0775
CPC classification number: C07K1/145 , C12N5/0662 , C12N5/0668 , C12N2501/998
Abstract: 本发明公开了一种鹿胎盘活性蛋白及其提取方法和应用,所述方法包括以下步骤:取鹿胎盘进行预处理;将预处理后的鹿胎盘冷冻后切碎,加入含蛋白酶抑制剂的生理盐水,制成匀浆;将匀浆完全冻结后再迅速溶化,重复1‑3次;将处理后的匀浆进行超声破碎细胞,然后离心分离收取上清液;将上清液冷却后加入丙酮,过滤收集沉淀,将沉淀干燥后得到粉末;将粉末溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入饱和硫酸铵至饱和度为0.25,离心去除沉淀,然后取上清液调节pH值,加饱和硫酸铵至饱和度为0.50,得到盐析物;将盐析物溶于Tris‑Hcl缓冲液中,超滤得到超滤液;将超滤液脱盐后,干燥得到鹿胎盘活性蛋白。本发明的鹿胎盘活性蛋白能够促进干细胞增殖。
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公开(公告)号:CN109627282B
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN201811340286.2
申请日:2018-11-12
Applicant: 吉林大学
IPC: C07K1/14 , C12N5/0775
Abstract: 本发明公开了一种鹿胎盘活性蛋白及其提取方法和应用,所述方法包括以下步骤:取鹿胎盘进行预处理;将预处理后的鹿胎盘冷冻后切碎,加入含蛋白酶抑制剂的生理盐水,制成匀浆;将匀浆完全冻结后再迅速溶化,重复1‑3次;将处理后的匀浆进行超声破碎细胞,然后离心分离收取上清液;将上清液冷却后加入丙酮,过滤收集沉淀,将沉淀干燥后得到粉末;将粉末溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入饱和硫酸铵至饱和度为0.25,离心去除沉淀,然后取上清液调节pH值,加饱和硫酸铵至饱和度为0.50,得到盐析物;将盐析物溶于Tris‑Hcl缓冲液中,超滤得到超滤液;将超滤液脱盐后,干燥得到鹿胎盘活性蛋白。本发明的鹿胎盘活性蛋白能够促进干细胞增殖。
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