公开(公告)号：CN113736853A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202111038379.1

申请日：2021-09-06

Applicant: 吉林大学

Inventor： 徐抒平 ,  苏艾玲 ,  梁重阳 ,  徐蔚青

IPC: C12Q1/6816 ,  C12Q1/70 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a蛋白对基因的表面增强拉曼光谱检测方法。本发明利用目标病毒核酸与Cas12a、crRNA形成三元复合体，开启切割体系中的底物(即：ssDNA)。ssDNA是探针1和探针2上DNA1和DNA2的桥连互补序列。探针1和探针2是否被桥连可引起SERS信号的变化，即可知待检样品中是否含有目标核酸。利用特异性的crRNA可以实现对病毒核酸的准确快速检测。本发明将CRISPR@Cas12a与SERS技术结合最大的优势是避免繁琐的修饰制备过程，SERS探针可以长期稳定存在。该方法信号放大关键步骤发生在ssDNA的溶液相，而非纳米组装体的界面上，因此具有更稳定和更高反式切割效率，可保障该检测方法的灵敏度和重复性，对疾病早期监测诊断与防控具有重要意义。

公开(公告)号：CN118853942A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202411144944.6

申请日：2024-08-20

Applicant: 吉林大学 ,  吉林省农业科学院(中国农业科技东北创新中心)

Inventor： 徐抒平 ,  王慧敏 ,  苏艾玲 ,  刘相国 ,  尹悦佳

IPC: C12Q1/6895 ,  G01N21/65 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/113 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明适用于基因检测技术领域，提供了CRISPR/dCas9蛋白结合拉曼编码的转基因玉米检测方法，包括sgRNA的筛选、磁性聚合物微球‑dCas9‑sgRNA三元复合物的制备、磁性聚合物微球‑dCas9‑sgRNA三元复合物对目标转基因DNA的捕获以及荧光染料染色；荧光成像及拉曼编码检测；检测结果判别。本发明将CRISPR/dCas9与拉曼编码技术相结合用于转基因农作物的多重检测，可以同时区分不同厂家的转基因品类，拓宽了CRISPR体系单一检测的限制。该检测方法能够高效、精准地检测转基因序列，具有操作简单的优点，对转基因作物的监管具有重要意义。