公开(公告)号：CN108752423B

公开(公告)日：2019-12-17

申请号：CN201810519141.2

申请日：2018-05-25

Applicant: 吉林大学

Inventor： 尹继刚 ,  王东强 ,  张天宇 ,  焦新 ,  邵青延

IPC: C07K7/06 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明提供了一种微小隐孢子虫检测用TSP7多肽序列及其应用，它是利用微小隐孢子虫多肽TSP7与KLH偶联后作为抗原，免疫Balb/c小鼠，制备单克隆抗体，收集样品（卵囊），脱囊液脱囊，室温孵育成子孢子，透化液透化，分别加入单克隆抗体、二抗、PBS缓冲液、荧光染料、抗荧光猝灭剂，利用荧光显微镜观察样本。经反复多次实验表明，偶联KLH的六种隐孢子虫特异性多肽具有良好的免疫源性，免疫小鼠可以均可得到理想效价的杂交瘤细胞；每次筛选的都能筛选出效价均达到1:16000以上的单克隆抗体，都可用作荧光检测。利用TSP7合成多肽做制备的单克隆抗体可以很灵敏的标记在微小隐孢子虫子孢子的表面，没有发生交叉反应。

公开(公告)号：CN108752423A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810519141.2

申请日：2018-05-25

Applicant: 吉林大学

Inventor： 尹继刚 ,  王东强 ,  张天宇 ,  焦新 ,  邵青延

IPC: C07K7/06 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明提供了一种微小隐孢子虫检测用TSP7多肽序列及其应用，它是利用微小隐孢子虫多肽TSP7与KLH偶联后作为抗原，免疫Balb/c小鼠，制备单克隆抗体，收集样品（卵囊），脱囊液脱囊，室温孵育成子孢子，透化液透化，分别加入单克隆抗体、二抗、PBS缓冲液、荧光染料、抗荧光猝灭剂，利用荧光显微镜观察样本。经反复多次实验表明，偶联KLH的六种隐孢子虫特异性多肽具有良好的免疫源性，免疫小鼠可以均可得到理想效价的杂交瘤细胞；每次筛选的都能筛选出效价均达到1:16000以上的单克隆抗体，都可用作荧光检测。利用TSP7合成多肽做制备的单克隆抗体可以很灵敏的标记在微小隐孢子虫子孢子的表面，没有发生交叉反应。

公开(公告)号：CN108752422B

公开(公告)日：2019-12-24

申请号：CN201810513813.9

申请日：2018-05-25

Applicant: 吉林大学

Inventor： 尹继刚 ,  张天宇 ,  王东强 ,  焦新 ,  邵青延

IPC: C07K7/06 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种微小隐孢子虫检测用TSP4多肽序列及用途，利用微小隐孢子虫多肽TSP4与KLH偶联后作为抗原，免疫Balb/c小鼠，制备单克隆抗体，收集样品（卵囊），脱囊液脱囊，室温孵育成子孢子，透化液透化，分别加入单克隆抗体、二抗、PBS缓冲液、荧光染料、抗荧光猝灭剂，利用荧光显微镜观察样本。经反复多次实验表明，偶联KLH的六种隐孢子虫特异性多肽具有良好的免疫源性，免疫小鼠可以均可得到理想效价的杂交瘤细胞；每次筛选的都能筛选出效价均达到1:16000以上的单克隆抗体，都可用作荧光检测。利用TSP4合成多肽制备的单克隆抗体可以很灵敏的标记在微小隐孢子虫子孢子的表面，没有发生交叉反应。

公开(公告)号：CN108752422A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810513813.9

申请日：2018-05-25

Applicant: 吉林大学

Inventor： 尹继刚 ,  张天宇 ,  王东强 ,  焦新 ,  邵青延

IPC: C07K7/06 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种微小隐孢子虫检测用TSP4多肽序列及用途，利用微小隐孢子虫多肽TSP4与KLH偶联后作为抗原，免疫Balb/c小鼠，制备单克隆抗体，收集样品（卵囊），脱囊液脱囊，室温孵育成子孢子，透化液透化，分别加入单克隆抗体、二抗、PBS缓冲液、荧光染料、抗荧光猝灭剂，利用荧光显微镜观察样本。经反复多次实验表明，偶联KLH的六种隐孢子虫特异性多肽具有良好的免疫源性，免疫小鼠可以均可得到理想效价的杂交瘤细胞；每次筛选的都能筛选出效价均达到1:16000以上的单克隆抗体，都可用作荧光检测。利用TSP4合成多肽制备的单克隆抗体可以很灵敏的标记在微小隐孢子虫子孢子的表面，没有发生交叉反应。