引物组合及其用于华支睾吸虫核酸数字化检测的应用和方法

    公开(公告)号:CN118516476A

    公开(公告)日:2024-08-20

    申请号:CN202410995722.9

    申请日:2024-07-24

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及生物和化学领域,特别涉及引物组合及其用于华支睾吸虫核酸数字化检测的应用和方法。该方法包括以下步骤:(1)华支睾吸虫特异性靶基因的筛选;(2)重组酶聚合酶等温扩增靶基因;(3)CRISPR/Cas12a体系识别靶基因,反式切割功能磁珠的ssDNA,释放出蔗糖酶;(4)分离磁珠,游离的蔗糖酶催化底物蔗糖生成葡萄糖;(5)通过血糖仪测定葡萄糖浓度,实现核酸数字化检测。本发明特异性强、灵敏度高、成本低,无需昂贵仪器辅助,检测结果易读取,具有一定的应用前景。

    一种Ts-TTPA抗原在制备旋毛虫病早期诊断试剂中的应用

    公开(公告)号:CN117050980A

    公开(公告)日:2023-11-14

    申请号:CN202311318816.4

    申请日:2023-10-12

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明适用于生物检测技术领域,提供了一种Ts‑TTPA抗原在制备旋毛虫病早期诊断试剂中的应用,包括:进行旋毛虫肌幼虫胞外囊泡的分离与鉴定;通过LC‑MS/MS鉴定蛋白质;筛选目标蛋白Ts‑TTPA;进行蛋白质表达和纯化,得到rTs‑TTPA;对rTs‑TTPA进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹分析;进行酶联免疫吸附实验。本发明采用LC‑MS/MS结合生物信息学分析方法,筛选出旋毛虫肌幼虫胞外囊泡蛋白,并利用其构建间接ELISA的检测方法,能够在7 dpi检测到受感染的血清,3份感染1000条旋毛虫的猪血清在13 dpi时被完全检出;本方法填补了旋毛虫IgG检测的窗口期,并且有利于临床早期诊断。

    引物组合及其用于华支睾吸虫核酸数字化检测的应用和方法

    公开(公告)号:CN118516476B

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202410995722.9

    申请日:2024-07-24

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及生物和化学领域,特别涉及引物组合及其用于华支睾吸虫核酸数字化检测的应用和方法。该方法包括以下步骤:(1)华支睾吸虫特异性靶基因的筛选;(2)重组酶聚合酶等温扩增靶基因;(3)CRISPR/Cas12a体系识别靶基因,反式切割功能磁珠的ssDNA,释放出蔗糖酶;(4)分离磁珠,游离的蔗糖酶催化底物蔗糖生成葡萄糖;(5)通过血糖仪测定葡萄糖浓度,实现核酸数字化检测。本发明特异性强、灵敏度高、成本低,无需昂贵仪器辅助,检测结果易读取,具有一定的应用前景。

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