公开(公告)号：CN115772531B

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202211410687.7

申请日：2022-11-11

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 杨美英 ,  吴雷 ,  杨雪 ,  赵合美 ,  朱原 ,  武志海 ,  魏晓双 ,  田平 ,  王东超

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C02F3/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种果胶酸裂解酶基因突变体及其克隆方法和应用，从细菌菌株FY1中克隆得到野生型果胶酸裂解酶基因BaPel，并测序获得完整野生型果胶酸裂解酶基因序列；通过Discovery Studio软件将野生型果胶酸裂解酶基因序列的155位的甘氨酸Gly突变成丙氨酸Ala或缬氨酸Val，并克隆出果胶酸裂解酶基因突变体G155A或果胶酸裂解酶基因突变体G155V。与现有技术相比，本发明克隆的果胶酸裂解酶基因突变体G155A可以增加酶在30‑40℃的热稳定性，克隆的果胶酸裂解酶基因突变体G155V可增加3倍的酶活，酶活可达756U/mg，这要明显高于目前报道的细菌果胶酸裂解酶酶活性。该方法简便快捷，可有效提高酶的活性及热稳定性，有利于生产实践的应用。

公开(公告)号：CN115772531A

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202211410687.7

申请日：2022-11-11

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 杨美英 ,  吴雷 ,  杨雪 ,  赵合美 ,  朱原 ,  武志海 ,  魏晓双 ,  田平 ,  王东超

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C02F3/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种果胶酸裂解酶基因突变体及其克隆方法和应用，从细菌菌株FY1中克隆得到野生型果胶酸裂解酶基因BaPel，并测序获得完整野生型果胶酸裂解酶基因序列；通过Discovery Studio软件将野生型果胶酸裂解酶基因序列的155位的甘氨酸Gly突变成丙氨酸Ala或缬氨酸Val，并克隆出果胶酸裂解酶基因突变体G155A或果胶酸裂解酶基因突变体G155V。与现有技术相比，本发明克隆的果胶酸裂解酶基因突变体G155A可以增加酶在30‑40℃的热稳定性，克隆的果胶酸裂解酶基因突变体G155V可增加3倍的酶活，酶活可达756U/mg，这要明显高于目前报道的细菌果胶酸裂解酶酶活性。该方法简便快捷，可有效提高酶的活性及热稳定性，有利于生产实践的应用。