公开(公告)号：CN116479047B

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202310443379.2

申请日：2023-04-24

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王建忠 ,  王瑞楠 ,  宗宪春 ,  朱广美 ,  段姝宇 ,  胡静涛 ,  杨桂连 ,  王春凤

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/45 ,  C12N7/01 ,  C12N15/113 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种新城疫病毒双质粒拯救系统及其构建方法、鉴定方法与应用，先基于CMV启动子构建新城疫病毒LaSota株全基因组cDNA克隆质粒，然后构建可同时表达NP、P、L蛋白的多启动子单辅助质粒pCI‑NPL，最终建立了双质粒病毒拯救系统，并成功产生了具有感染性的新城疫子代病毒颗粒。基于EGFP报告基因进行拯救效率评价的结果显示，双质粒系统的拯救效率更高。此外通过血凝效价、EID50、MDT、ICPI、IVPI检测结果表明，重组病毒rLaSota和rLaSota‑EGFP具有与亲本野生型毒株相似的生物学特性，为新城疫病毒及其他负链RNA病毒构建更加简便、高效的拯救系统提供新的思路。

公开(公告)号：CN116479047A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310443379.2

申请日：2023-04-24

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王建忠 ,  王瑞楠 ,  宗宪春 ,  朱广美 ,  段姝宇 ,  胡静涛 ,  杨桂连 ,  王春凤

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/45 ,  C12N7/01 ,  C12N15/113 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种新城疫病毒双质粒拯救系统及其构建方法、鉴定方法与应用，先基于CMV启动子构建新城疫病毒LaSota株全基因组cDNA克隆质粒，然后构建可同时表达NP、P、L蛋白的多启动子单辅助质粒pCI‑NPL，最终建立了双质粒病毒拯救系统，并成功产生了具有感染性的新城疫子代病毒颗粒。基于EGFP报告基因进行拯救效率评价的结果显示，双质粒系统的拯救效率更高。此外通过血凝效价、EID50、MDT、ICPI、IVPI检测结果表明，重组病毒rLaSota和rLaSota‑EGFP具有与亲本野生型毒株相似的生物学特性，为新城疫病毒及其他负链RNA病毒构建更加简便、高效的拯救系统提供新的思路。