公开(公告)号：CN107058121A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710109350.5

申请日：2017-02-27

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 姚方杰 ,  刘宏宇 ,  方明 ,  张友民 ,  陆甲 ,  张伟彤

IPC: C12N1/14 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12N1/14

Abstract: 本发明涉及一种高效的黑木耳原生质体制备方法，属于黑木耳的高效原生质体制备方法。制作固体PDA培养基，将黑木耳菌种在超净工作台中取0.5cm×0.5cm大小菌块放置于PDA固体培养基上；制备液体加富菌丝培养基，在无菌环境中向长满菌丝的固体PDA培养皿中倒入10mL，刮取固体PDA培养基表面的菌丝，配制高渗溶液及酶液：将在液体培养基中培养7d的菌丝进行过滤，收集菌丝，离心，轻柔的颠倒10‑15次以重悬原生质体后，在显微镜下，使用血球计数板测量并计算原生质体数目。优点是菌丝培养过程中加入了丝氨酸，可以在一定程度上抑制菌丝细胞壁的增厚。通过实验对比筛选其效果。同时将各步骤的操作具体细化定量，做到了试验可重复。