公开(公告)号：CN102621303A

公开(公告)日：2012-08-01

申请号：CN201110031802.5

申请日：2011-01-30

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 杜锐 ,  于淼 ,  时坤 ,  李建明 ,  刁燕 ,  刘晓 ,  张梦 ,  刘东旭

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535

Abstract: 鹿结核病间接酶联免疫吸附检测法属于兽医领域。克服以往鹿结核病检测特异性差，敏感性低等不足。所选用的生物材料有：牛型提纯蛋白衍生物(PPD)、兔抗鹿IgG，兔抗鹿IgG-HRP、标准阳性血清、标准阴性血清、待检血清。检测方法的步骤有包被抗原、加血清、加酶结合物-兔抗鹿IgG-HRP、加底物-兔抗鹿IgG、终止反应后用酶联免疫检测仪测量，在490nm处空白调零，测各孔的OD值；以PPD的OD值≥0.56为阳性。本发明的积极效果是：在首创完成兔抗鹿二抗的基础上，对鹿结核间接ELISA的诊断抗原进行筛选，以牛型提纯蛋白衍生物(PPD)作为最佳抗原并确立了最佳试验步骤和条件，建立一种特异性强，敏感性高，简便快捷，耗资少的鹿结核病诊断方法。

公开(公告)号：CN104569378A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201410814703.8

申请日：2014-12-25

Applicant: 杜锐 ,  吉林农业大学

Inventor： 杜锐 ,  王文玉 ,  曾范利 ,  时坤 ,  宗颖 ,  李健明 ,  刘东旭

IPC: G01N33/543

CPC classification number: G01N33/53 ,  G01N33/543

Abstract: 鹿结核病自然感染与卡介苗免疫间接酶联免疫吸附检测法。该检测法选用的生物材料有：纯化蛋白GST-Rv3872-74-75，牛血清白蛋白BSA，兔抗鹿IgG-HRP，标准阳性血清，标准阴性血清，待检血清。检测步骤包括包被抗原、封闭、加血清、加酶结合物—兔抗鹿IgG-HRP、加底物、终止反应、用酶联免疫检测仪测量。本发明的积极效果是：在完成兔抗鹿二抗的基础上，进一步对鹿结核病自然感染与卡介苗免疫间接ELISA的诊断抗原进行筛选，以纯化蛋白GST-Rv3872-74-75作为最佳抗原并确立了最佳试验步骤和条件，建立一种特异性强，敏感性高，简便快捷，耗资少的鹿结核病自然感染与卡介苗免疫鉴别诊断方法。

公开(公告)号：CN102621304A

公开(公告)日：2012-08-01

申请号：CN201110031816.7

申请日：2011-01-30

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 杜锐 ,  刘东旭 ,  时坤 ,  李建明 ,  刁燕 ,  刘晓 ,  张梦 ,  于淼

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535

Abstract: 鹿布氏杆菌病间接酶联免疫吸附检测法，属于兽医领域。用于鹿布氏杆菌病诊断，提高相对现有技术的诊断水平。本发明的检测方法所用生物材料包括：作为抗原的布氏杆菌猪型2号苗(S2)、酶标抗体兔抗鹿IgG-HRP、标准阳性血清、标准阴性血清、待检血清：检测步骤包括：抗原包被、洗涤、加血清、加兔抗鹿IgG-HRP、加底物液、终止反应、用酶联检测仪在490nm处空白调零，并测每孔的OD值，OD值≥0.32判定为阳性。本发明的积极效果是，以布氏杆菌猪型2号苗(S2)为抗原，兔抗鹿IgG-HRP为酶标抗体，用间接酶联免疫吸附检测诊断鹿布氏杆菌病，和以往的诊断方法相比，具有特异性、敏感性和重复性较好，诊断精确的优点。