无抗性筛选标签残留的转座子系统及其应用

    公开(公告)号:CN120060303A

    公开(公告)日:2025-05-30

    申请号:CN202510085414.7

    申请日:2025-01-20

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明涉及一种无抗性筛选标签残留的转座子系统及其应用,该该转座子系统为单质粒转座子系统或双质粒转座子系统;所述单质粒转座子系统包括表达转座酶、并携带报告基因和ptxD基因的第一质粒;所述双质粒转座子系统包括表达转座酶的第二质粒和携带报告基因和ptxD基因的第三质粒。该转座子系统利用ptxD筛选标签,可以实现无抗生素抗性基因残留的基因整合,可避免抗性筛选标签残留带来的安全隐患和代谢负担,在实际生产应用中更具有竞争力。

    一种可记忆瞬态热刺激的重组菌株的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN118086345A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410175155.2

    申请日:2024-02-07

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋 陈浩锋

    Abstract: 本发明涉及一种可记忆瞬态热刺激的重组菌株的构建方法及其应用,该方法包括:在表达菌株中敲入群体感应分子酰基高丝氨酸内酯AHL响应启动子PLasI及其所调控的T7RNAP基因,并导入热激响应模块ci857‑PR‑FourU调控的信号分子表达基因LasI、协同蛋白基因LasR,以及受T7启动子调控的报告基因,得到可记忆瞬态热刺激的重组菌株。将所述重组菌株放置于37℃的培养条件时,菌株响应温度并积累信号分子AHL,达到阈值后诱导T7RNA聚合酶,以触发报告基因的表达;该重组菌株可感知热刺激并放大信号输出,具有表达时间可控,表达丰度可控,记忆热刺激信号的特点,由于热刺激的记忆功能,极大改善传统热激系统的热休克反应,具有良好的生物工程应用前景。

    一种生产视黄醛的酿酒酵母重组菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN115786151A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211046794.6

    申请日:2022-08-30

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋 莫棋文

    Abstract: 本发明涉及一种生产视黄醛的酿酒酵母重组菌株及其构建方法,该构建方法包括将酿酒酵母的adh6基因、adh7基因、sfa1基因、gre2基因和hfd1基因进行敲除,获得工程菌株,使所述工程菌株异源表达香叶基香叶基二磷酸合成酶CrtE、双功能番茄红素环化酶/茄红素合成酶CrtYB、番茄红素脱氢酶CrtI和β‑胡萝卜素‑15,15’‑加双氧酶BCMO,获得酿酒酵母重组菌株。该重组菌株可提高视黄醛的纯度,解决酿酒酵母无法生产高纯度视黄醛的问题,具有广阔的工业化应用前景。

    氰胺诱导的酿酒酵母工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN116254286B

    公开(公告)日:2024-07-12

    申请号:CN202211663787.0

    申请日:2022-12-23

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋 宋婧雅

    Abstract: 本发明涉及一种氰胺诱导的酿酒酵母工程菌及其构建方法,其构建方法包括:将酿酒酵母菌中的半乳糖调控系统的转录抑制因子Gal80敲除,将酿酒酵母菌中的转录激活因子Gal4的启动子替换为氰胺诱导型DDI2/3启动子,所获的酿酒酵母工程菌可以使氰胺诱导系统偶联半乳糖(GAL)表达系统,实现氰胺剂量响应的GAL表达系统信号输出。当氰胺诱导系统用于调控酿酒酵母菌中内源ARO1突变体(N端降解子融合于AroD组份)的活性时,该表达系统表现出良好的低渗漏特征。因此,采用上述方法构建可得到严谨可控且高效的酿酒酵母蛋白表达系统,未来可应用于高效表达蛋白。

    一种非发酵型酿酒酵母工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN115216413A

    公开(公告)日:2022-10-21

    申请号:CN202110414175.7

    申请日:2021-04-16

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋

    Abstract: 本发明涉及一种非发酵型酿酒酵母工程菌及其构建方法,其构建方法包括:将酿酒酵母菌株CENPK2‑1C的HXK2、GLK1己糖激酶基因敲除,将HXK1己糖激酶的启动子替换为ADH2醇脱氢酶的启动子。从而获得一株代谢状态由发酵型转变为有氧呼吸型的酵母工程菌。该酿酒酵母工程菌的代谢状态转变为非发酵型而不产乙醇,可作为底盘细胞更为高效地生产高附加值化学品,且具有较好的生物质积累,因而具有广阔的工业化应用前景。

    一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法及应用

    公开(公告)号:CN111647616B

    公开(公告)日:2022-05-03

    申请号:CN202010581182.1

    申请日:2020-06-23

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋 陈玉芬

    Abstract: 本发明涉及一种生产原儿茶酸的大肠杆菌构建方法及应用,该方法包括:PCR扩增获取PmLAAD、HmaS、HMO、BFD、HFD1、HpaBC、PobA七种基因;构建质粒pET‑PmLAAD‑HmaS、质粒pCDF‑HMO‑BFD、质粒pACYC‑HpaBC和质粒pACYC‑PobA和质粒pRSF‑HFD1;将上述部分质粒共同转入大肠杆菌MG1655RARE感受态细胞中,分别得到第一重组大肠杆菌工程菌和第二重组大肠杆菌工程菌。根据本发明实施例,该方法获得的重组大肠杆菌可使原儿茶酸达最大收率,具有广阔的工业化应用前景。

    一种基因工程菌株生物催化生产L-苯甘氨酸的方法

    公开(公告)号:CN113308486A

    公开(公告)日:2021-08-27

    申请号:CN202110394270.5

    申请日:2021-04-13

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋

    Abstract: 本发明涉及一种基因工程菌株生物催化生产L‑苯甘氨酸的方法,该方法包括:将编码L‑α‑氨基酸脱氨酶的基因、编码羟基扁桃酸合成酶的基因和载体通过酶切连接,得到第一重组质粒;将编码扁桃酸脱氢酶的基因、编码亮氨酸脱氢酶的基因和载体通过酶切连接,得到第二重组质粒;将所述第一重组质粒和所述第二重组质粒共同转入宿主细胞中,得到基因工程菌。根据本发明实施例,该方法获得的基因工程菌生物催化L‑苯丙氨酸,可使L‑苯甘氨酸达最大收率,具有广阔的工业化应用前景。

    一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法及应用

    公开(公告)号:CN111647616A

    公开(公告)日:2020-09-11

    申请号:CN202010581182.1

    申请日:2020-06-23

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 袁吉锋 陈玉芬

    Abstract: 本发明涉及一种生产原儿茶酸的大肠杆菌构建方法及应用,该方法包括:PCR扩增获取PmLAAD、HmaS、HMO、BFD、HFD1、HpaBC、PobA七种基因;构建质粒pET-PmLAAD-HmaS、质粒pCDF-HMO-BFD、质粒pACYC-HpaBC和质粒pACYC-PobA和质粒pRSF-HFD1;将上述部分质粒共同转入大肠杆菌MG1655RARE感受态细胞中,分别得到第一重组大肠杆菌工程菌和第二重组大肠杆菌工程菌。根据本发明实施例,该方法获得的重组大肠杆菌可使原儿茶酸达最大收率,具有广阔的工业化应用前景。

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