公开(公告)号：CN101293099B

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN200810071174.1

申请日：2008-06-04

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  张国广 ,  张辉煌 ,  李东霄 ,  曾雅明 ,  张红心 ,  郭小玲

IPC: A61K39/145 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C07K19/00 ,  A61P31/16

Abstract: 一种抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及其制备方法，涉及一种多肽疫苗，提供一种能同时有效预防多种亚型禽流感病毒、且安全可靠的抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及制备方法。多肽疫苗是以病毒样颗粒形式存在，禽流感病毒M2e表位被有效呈递在病毒样颗粒表面，构成病毒样颗粒亚基的氨基酸序列和编码该氨基酸序列的DNA序列。设计相应的引物，得DNA序列；再插入到载体pMAL-c2x的多克隆位点区，形成多肽疫苗的表达载体质粒pMALc2x-M2eHBc+，重组质粒转化大肠杆菌得重组基因工程菌；接种培养，加入IPTG，诱导目的基因表达，离心收集菌体细胞，冻融，加入PBS缓冲液重悬菌体，离心取上清液，过滤纯化。

公开(公告)号：CN101016570B

公开(公告)日：2011-08-31

申请号：CN200710008609.3

申请日：2007-02-13

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  于广福 ,  邵寒娟 ,  张国广 ,  窦敏 ,  曾雅明

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒，涉及一种病毒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的H5亚型禽流感病毒核酸检测方法和试剂盒。步骤：1)寻求H5亚型禽流感病毒特有的保守序列作为待测靶基因；2)设计合成一对特异性引物，引物长度为18-30bp；3)根据保守序列设计合成一对Y型双链特异性荧光探针；4)使用步骤2中的一对特异性引物和步骤3中的Y型双链特异性荧光探针及PCR成份组成20μL荧光PCR反应体系的检测溶液，将荧光PCR反应体系的检测溶液装入PCR反应管；5)设置阳性对照模板和阴性对照模板，进行实时荧光PCR反应，获得检测结果。

公开(公告)号：CN101293099A

公开(公告)日：2008-10-29

申请号：CN200810071174.1

申请日：2008-06-04

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  张国广 ,  张辉煌 ,  李东霄 ,  曾雅明 ,  张红心 ,  郭小玲

IPC: A61K39/145 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C07K19/00 ,  A61P31/16

Abstract: 一种抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及其制备方法，涉及一种多肽疫苗，提供一种能同时有效预防多种亚型禽流感病毒、且安全可靠的抗多种亚型禽流感病毒的多肽疫苗及制备方法。多肽疫苗是以病毒样颗粒形式存在，禽流感病毒M2e表位被有效呈递在病毒样颗粒表面，构成病毒样颗粒亚基的氨基酸序列和编码该氨基酸序列的DNA序列。设计相应的引物，得DNA序列；再插入到载体pMAL－c2x的多克隆位点区，形成多肽疫苗的表达载体质粒pMALc2x－M2eHBc+，重组质粒转化大肠杆菌得重组基因工程菌；接种培养，加入IPTG，诱导目的基因表达，离心收集菌体细胞，冻融，加入PBS缓冲液重悬菌体，离心取上清液，过滤纯化。

公开(公告)号：CN101058803A

公开(公告)日：2007-10-24

申请号：CN200710008843.6

申请日：2007-04-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  窦敏 ,  张国广 ,  张红心 ,  曾雅明

IPC: C12N7/01 ,  C12Q1/70 ,  G01N33/569 ,  C12N15/42

Abstract: 含O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用，涉及一种病毒样颗粒。提供一种安全、耐核糖核酸酶、稳定性好、易保存、可全程监控RNA病毒提取、反转录、扩增以及最终检测的含有O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用。病毒样颗粒是指由MS2噬菌体外壳蛋白包裹含口蹄疫病毒IRES RNA的一种RNA－蛋白复合体，RNA－蛋白复合体的形状为球状，直径为24～28nm，具有耐核糖核酸酶的特性。制备步骤：初载体pET32a－CP的构建；终载体pET32a－CP－IRES的构建；病毒样颗粒的原核表达；病毒样颗粒的纯化。

公开(公告)号：CN1807626A

公开(公告)日：2006-07-26

申请号：CN200510129961.3

申请日：2005-12-16

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  何艺宾 ,  沈明山 ,  张红心 ,  曾雅明 ,  王蕾

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12N15/67 ,  C12N15/70 ,  C12N15/74 ,  C12N15/82

Abstract: 水稻细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂基因，涉及水稻中第一个细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂基因，命名为OsICK1。提供一种通过RT－PCR的方法克隆得到的新的具有调控细胞周期的功能基因，即水稻中的第1个细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂基因，命名为OsICK1基因。基因编码序列全长为585bp，共编码194个氨基酸，其中1－3的ATG为启始密码子，583－585的TGA为终止密码子。其克隆方法为根据blast分析结果，以NCBI上公布的核酸序列为基础设计引物，提取水稻总RNA，扩增出585bp的核酸片断并回收连接到pMD－18T载体上测序确证。是一种新的具有调控细胞周期的功能基因。

公开(公告)号：CN100564521C

公开(公告)日：2009-12-02

申请号：CN200710008843.6

申请日：2007-04-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  窦敏 ,  张国广 ,  张红心 ,  曾雅明

IPC: C12N7/01 ,  C12Q1/70 ,  G01N33/569 ,  C12N15/42

Abstract: 含O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用，涉及一种病毒样颗粒。提供一种安全、耐核糖核酸酶、稳定性好、易保存、可全程监控RNA病毒提取、反转录、扩增以及最终检测的含有O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用。病毒样颗粒是指由MS2噬菌体外壳蛋白包裹含口蹄疫病毒IRES RNA的一种RNA-蛋白复合体，RNA-蛋白复合体的形状为球状，直径为24～28nm，具有耐核糖核酸酶的特性。制备步骤：初载体pET32a-CP的构建；终载体pET32a-CP-IRES的构建；病毒样颗粒的原核表达；病毒样颗粒的纯化。

公开(公告)号：CN101016570A

公开(公告)日：2007-08-15

申请号：CN200710008609.3

申请日：2007-02-13

Applicant: 厦门大学

Inventor： 陈亮 ,  于广福 ,  邵寒娟 ,  张国广 ,  窦敏 ,  曾雅明

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒，涉及一种病毒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的H5亚型禽流感病毒核酸检测方法和试剂盒。步骤：1)寻求H5亚型禽流感病毒特有的保守序列作为待测靶基因；2)设计合成一对特异性引物，引物长度为18－30bp；3)根据保守序列设计合成一对Y型双链特异性荧光探针；4)使用步骤2中的一对特异性引物和步骤3中的Y型双链特异性荧光探针及PCR成份组成20μL荧光PCR反应体系的检测溶液，将荧光PCR反应体系的检测溶液装入PCR反应管；5)设置阳性对照模板和阴性对照模板，进行实时荧光PCR反应，获得检测结果。