公开(公告)号：CN109856259A

公开(公告)日：2019-06-07

申请号：CN201811643412.1

申请日：2018-12-29

Applicant: 南通大学附属医院

Inventor： 肖明兵 ,  陈晓阳 ,  季洁 ,  瞿利帅 ,  刘金霞 ,  焦钰洁 ,  江枫 ,  钱坤艳 ,  纪易斐

IPC: G01N30/02

Abstract: 本发明提供一种血清胰腺癌外泌体特异蛋白，包括蛋白ADAM10、蛋白CFHR1、蛋白APOA4、蛋白Testicular tissue protein Li 70、蛋白HEL-S-78p、蛋白PGLYRP2、蛋白IGFALS、蛋白BCHE、蛋白ANPEP、蛋白LBP、蛋白C9、蛋白PZP、蛋白ANXA11。本发明还提供一种血清胰腺癌外泌体特异蛋白再验证过程，包括以下步骤：S1、分离血清样品中的无外泌体血清与外泌体；S2、采用步骤S1分离得到的外泌体，制备出外泌体PBS溶液；S3、通过透射电子显微镜来检查外泌体的超微结构；S4、通过蛋白质印迹分析来检测一些外泌体表面标志物蛋白的表达。本发明的血清胰腺癌外泌体特异蛋白，能够用于制备诊断胰腺癌的相关产品，血清胰腺癌外泌体特异蛋白再验证过程具有绝对特异性、高通量、无干扰、能够识别大分子异构体和小分子的优点。

公开(公告)号：CN110068685B

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN201910367764.7

申请日：2019-05-05

Applicant: 南通大学附属医院

Inventor： 肖明兵 ,  季洁 ,  谢旭东 ,  陆玉华 ,  薛万江 ,  谭忠华 ,  陆翠华 ,  陈晓君 ,  刘肇修 ,  许敏雪

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543

Abstract: 品扩散后交叉污染影响实验结果，实验结果更准本发明提供一种点免疫印迹检测的检测装 确。置，包括负压吸引装置、孔板、连接孔板和负压吸引装置的软管及紧密贴合在孔板上端面的硝酸纤维膜，所述孔板包括上层托板、密封连接在上层托板下方的下层托盘及设置于上层托板、下层托盘之间的负压空腔，所述下层托盘一侧设置有一供软管套接的连接管，所述上层托板上具有70个通孔，所述硝酸纤维膜与孔板上端面的大小相同。本发明还提供一种点免疫印迹检测的检测方(56)对比文件FRANK M. LADUCA等.Application of aNitrocellulose Immunoassay forQuantitation of Proteins Secreted inCulture Media.ANALYTICALBIOCHEMISTRY.1986,第158卷262-267.易忠群;武建国.点―免疫结合测定(DIBA)及其临床应用的研究进展.国际检验医学杂志.1989,10(第06期),1-3.

公开(公告)号：CN115305253A

公开(公告)日：2022-11-08

申请号：CN202210040013.6

申请日：2022-01-14

Applicant: 南通大学附属医院

Inventor： 肖明兵 ,  吴桐 ,  陈飞 ,  林仁杰 ,  季洁 ,  马彭 ,  崔小鹏 ,  钱坤艳 ,  徐伟松

IPC: C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/574 ,  G01N33/58 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种可用于外泌体示踪的重组胰腺癌细胞及其应用，属于生物医学技术领域；所述重组胰腺癌细胞包含重组载体；所述重组载体上插入有目的基因pHluorin_M153R‑CD63。本发明利用插入有目的基因pHluorin_M153R‑CD63的重组载体进行胰腺癌稳定细胞系的构建，并对细胞外的外泌体及其释放于细胞外基质中的尾部斑点进行有效标记后，可更容易地观察其寻径轨迹，从而揭示迁移活细胞的致病行为。本发明解决了外泌体致病行为机制研究中的可视化难题，构建得到了明亮、稳定、且适用于多种细胞培养环境的荧光示踪物质，可监测活细胞在迁移过程中外泌体的释放和摄取量，以及寻径轨迹的观察。

公开(公告)号：CN110068685A

公开(公告)日：2019-07-30

申请号：CN201910367764.7

申请日：2019-05-05

Applicant: 南通大学附属医院

Inventor： 肖明兵 ,  季洁 ,  谢旭东 ,  陆玉华 ,  薛万江 ,  谭忠华 ,  陆翠华 ,  陈晓君 ,  刘肇修 ,  许敏雪

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明提供一种点免疫印迹检测的检测装置，包括负压吸引装置、孔板、连接孔板和负压吸引装置的软管及紧密贴合在孔板上端面的硝酸纤维膜，所述孔板包括上层托板、密封连接在上层托板下方的下层托盘及设置于上层托板、下层托盘之间的负压空腔，所述下层托盘一侧设置有一供软管套接的连接管，所述上层托板上具有70个通孔，所述硝酸纤维膜与孔板上端面的大小相同。本发明还提供一种点免疫印迹检测的检测方法，包括准备、加样、封闭、孵育一抗、孵育二抗、显影、分析的过程，本发明通过负压吸引装置进行负压吸引，有利于加样时样品的集中，避免样品扩散后交叉污染影响实验结果，实验结果更准确。

公开(公告)号：CN110051668A

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201910310233.4

申请日：2019-04-17

Applicant: 南通大学附属医院

Inventor： 肖明兵 ,  焦钰洁 ,  季洁 ,  范义辉 ,  邰伯军 ,  谭忠华 ,  倪温慨 ,  陈晓君 ,  纪易斐

IPC: A61K31/426 ,  A61P35/00 ,  G01N33/50 ,  G01N33/535 ,  G01N33/569 ,  G01N33/574

Abstract: 本发明提供一种依帕司他在制备胰腺癌药物中的应用，胰腺癌药物应用于抑制胰腺癌细胞的外泌体分泌。一种抗胰腺癌的药品组合物，药品组合物含有依帕司他。所述药品组合物应用于抑制胰腺癌细胞的外泌体分泌。本发明的实施例还提供一种依帕司他对胰腺癌细胞分泌外泌体的抑制作用的验证方法，包括以下过程：利用低温超速离心法提取细胞上清外泌体；将收集的外泌体裂解后用BCA试剂盒定量蛋白，用测得的蛋白量来反映外泌体的量；透射电镜验证外泌体的双层脂质膜包裹的杯状结构；蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝检测外泌体蛋白浓度。本发明中提供了依帕司他有一个新的用途，即抑制外泌体分泌，依帕司他在临床肿瘤治疗中有巨大的应用潜力。