公开(公告)号：CN111286516A

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN202010141417.5

申请日：2020-03-04

Applicant: 南通大学

Inventor： 王东 ,  闵雯嫣

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/10 ,  A61K38/17 ,  A61K48/00 ,  A61P1/02 ,  A61P19/08

Abstract: 本发明提供了一种RANKL重组蛋白表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下过程：(1)体外分子克隆技术，获得小鼠RANKL基因全长；(2)通过测序，明确已获得克隆序列与数据库中的序列完全一致；进一步通过基因重组技术将小鼠RANKL基因重组于pET-32a表达载体中，成功构建RANKL重组蛋白表达载体。本发明还提供一种RANKL重组蛋白表达载体在制备治疗骨代谢异常相关疾病方面的应用。其中，所述骨代谢异常相关疾病包括骨硬化症及尖周肉牙肿病。本发明中的RANKL重组蛋白表达载体，可以通过在体外诱导表达大量RANKL重组蛋白，最后通过RANKL重组蛋白促进破骨细胞的分化及骨吸收功能，从而治疗和改善骨硬化症及尖周肉牙肿病。

公开(公告)号：CN111411121A

公开(公告)日：2020-07-14

申请号：CN202010314549.3

申请日：2020-04-21

Applicant: 南通大学

Inventor： 王东 ,  闵雯嫣

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/705 ,  A61K38/17 ,  A61P19/08

Abstract: 本发明公开一种获得具有生物学活性的RANKL重组蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）RANKL重组蛋白通过体外诱导大量表达；（2）通过纯化获得具有生物学活性的RANKL重组蛋白；（3）通过RANKL重组蛋白在体外促进破骨细胞的分化对其生物学活性进行鉴定的过程。本发明还公开一种具有生物学活性的RANKL重组蛋白在制备治疗骨代谢异常疾病药物中的应用，其特征在于，所述具有生活学活性的RANKL重组蛋白通过RANKL重组蛋白体外诱导表达、纯化及鉴定的方法获得；本发明提示了通过体外诱导表达及纯化RANKL重组蛋白来获取大量具有生物学活性的RANKL重组蛋白，有潜力成为用于治疗和改善骨硬化症及尖周肉牙肿病新途径。