公开(公告)号：CN113930454A

公开(公告)日：2022-01-14

申请号：CN202111421710.8

申请日：2021-11-26

Applicant: 南通大学

Inventor： 杨欢 ,  王洲 ,  汪洋 ,  王国华 ,  姜正林

IPC: C12N15/87 ,  C08G65/48

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，本发明公开了壳聚糖‑聚二甲双胍（CS‑PolyMet）在作为基因转染试剂方面的应用。还公开了壳聚糖‑聚二甲双胍的制备方法，包括以下过程：称取0.5 g壳聚糖，加20 mL水，搅拌至充分溶胀，加入2 M盐酸1 mL，继续搅拌至壳聚糖完全溶解，放入100℃油浴中，搅拌条件下分批加入0.5 g双氰胺，回流反应24 h，反应完毕后纯水透析3天，冷冻干燥，得白色絮状的CS‑PolyMet粉末，易溶于水，粉末可4℃保存。本发明合成的壳聚糖‑聚二甲双胍可通过聚合物本身正电荷与细胞周期同步效应高效转染目的基因，转染效果优于现有市售试剂，并且细胞毒性较市售试剂更低，具有潜在的市场应用价值。

公开(公告)号：CN113980902A

公开(公告)日：2022-01-28

申请号：CN202111421803.0

申请日：2021-11-26

Applicant: 南通大学

Inventor： 杨欢 ,  王国华 ,  王洲 ,  孙祥琳 ,  姜正林

IPC: C12N5/0786 ,  C12Q1/6881 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种高效诱导巨噬细胞极化的体外培养方法，包括以下步骤：步骤1、在无血清条件下，将THP‑1单核细胞用PMA和GM‑CSF刺激，使其分化为巨噬细胞；步骤2、使用20 ng/mL IFN‑γ与100 ng/mL LPS诱导步骤1所分化的巨噬细胞24 h得到M1型巨噬细胞；步骤3、使用20 ng/mL IL‑4与20 ng/mL IL‑10诱导步骤1所分化的巨噬细胞24 h后得到M2型巨噬细胞。本发明采用PMA与GM‑CSF诱导THP‑1单核细胞系分化为巨噬细胞后极化的经济且完善的模型，通过对多个标志物（CD11b、CD86、CD206、iNOS、CD206，Agr‑1，IL‑1β）的检测，对其诱导分化的巨噬细胞以及极化的M1、M2型巨噬细胞进行鉴定。