基于线粒体标记评估附睾精子的方法

    公开(公告)号:CN115807108A

    公开(公告)日:2023-03-17

    申请号:CN202211561881.5

    申请日:2022-12-07

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明涉及基于线粒体标记评估附睾精子的方法,步骤包括:选取成年的PHAMfloxed(♂)和DDX4cre的小鼠(♀),连续交配后获得可能发生脱靶效应的mito‑Dendra2‑flox小鼠:(PHAMHOMO,DDX4),(PHAMHET,DDX4),(PHAMHET,‑)或(PHAMHOMO,‑)。随后获取鼠尾,利用荧光显微镜观察Dendra2荧光信号,判定小鼠表达Dendra2荧光蛋白的情况。选取已经进行线粒体标记(mito‑Dendra2)的雄性荧光小鼠与雌性荧光小鼠交配,能稳定获得线粒体标记的荧光小鼠。获取mito‑Dendra2小鼠的组织,通过组织切片观察,所有的组织中均有明亮的Dendra2荧光信号。并且,附睾不同区段来源的精子中段也有明亮的dendra2信号。上述结果表明这种繁育策略能获得全身标记线粒体的小鼠后代,并且能标记附睾精子线粒体,为在体或体外研究线粒体功能提供合适的动物模型。

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