一种植物组织特异启动子的鉴定方法及其应用

    公开(公告)号:CN116200523B

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202211651359.6

    申请日:2022-12-21

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王凯 余光润 张会

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种植物组织特异启动子的鉴定方法及其应用。本发明基于顺式调控元件位点呈现染色质开放的特点,通过对基因上游近基因区域的开放染色质DHS搜索,高效鉴定出基因启动子;并经大量筛选鉴定发现,当基因具备一定条件的组织特异高表达时,可有效分离出茎组织特异启动子;以甘蔗为例,这一方法高效鉴定甘蔗茎特异启动子,检出率达到60%。本发明可快速、准确鉴定组织特异启动子,有利于甘蔗及其它作物通过优异基因利用,开展优异新品种培育;同时,该方法可推广到不同作物中,具有广泛的应用潜力和商业产品开

    一种甘蔗杂种真实性鉴定的分子标记体系及其开发方法

    公开(公告)号:CN113584184B

    公开(公告)日:2023-07-28

    申请号:CN202110891211.9

    申请日:2021-08-04

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王凯 禄小溪 张会

    Abstract: 本发明涉及生物信息学与分子遗传育种技术领域,尤其涉及一种甘蔗杂种真实性鉴定的分子标记体系及其开发方法,通过对甘蔗现代栽培种的两个亲本割手密种和热带种的全基因组DNA序列的比较,选取种间差异的同源序列并分别设计分子标记引物,采用多个热带种和割手密种材料进行PCR扩增及电泳检测后,选取覆盖不同染色体共计8个种间多态的分子标记,该标记系统在杂种F1产生杂合带型。本发明的热带种与割手密种间多态标记可检测甘蔗杂交种真实性,由于标记覆盖全部染色体可大大降低真实杂种漏检率,同时,各个标记在种内具有高度保守性,可用于不同亲本组合间的杂种后代真实性鉴定,具有较好普遍适用性。

    一种SsGolS2基因在提高植物抗旱性中的应用

    公开(公告)号:CN115873889B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202210428606.X

    申请日:2022-04-22

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王凯 韩苗苗 张会

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种SsGolS2基因在提高植物抗旱性中的应用,SsGolS2基因为割手密的SsGolS2基因,SsGolS2基因cDNA序列如SEQID NO.1所示;SsGolS2基因所编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示;SsGolS2基因在植物中高表达的方法是将含有SsGolS2基因的重组表达载体导入植物中。本发明证明割手密SES208中SsGolS2基因对提高植物抗旱能力有重要作用,SsGolS2基因可作为提高植物抗旱的重要基因资源,对于作物抗旱育种应用有重要意义和应用潜力。

    一种SsJMJ1基因在提高植物抗旱性中的应用

    公开(公告)号:CN114717258B

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202210514907.4

    申请日:2022-05-11

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种SsJMJ1基因在提高植物抗旱性中的应用,所述SsJMJ1基因为割手密的SsJMJ1基因;所述SsJMJ1基因cDNA序列如SEQ ID No.1所示;所述SsJMJ1基因所编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过分析具有较强抗旱特性的甘蔗野生种割手密发现,干旱胁迫下甘蔗多种组蛋白修饰发生显著变化,并且组蛋白去甲基化酶基因SsJMJ1在干旱胁迫下表达水平发生显著变化,通过体外和体内验证表明,提高SsJMJ1基因表达可增强植物耐旱性。由此可见,在具有较强抗旱性的甘蔗材料分离的SsJMJ1基因可作为提高植物抗旱的重要基因资源,具有作物抗旱育种应用潜力。

    一种甘蔗茎组织原生质体的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114480248A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210055248.2

    申请日:2022-01-18

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王凯 滕艾琳 张会

    Abstract: 本发明公开了一种甘蔗茎组织原生质体的制备方法和应用,属于植物原生质体技术领域。本发明通过采用多次低速离心与重悬的方法有效去除糖分物质,并采用改进包括取样部位、酶解溶液配方与解离时间等技术工艺参数的措施获得高纯度原生质体,达到每克组织4×107原生质体。同时,通过技术参数优化发明了适用于上述甘蔗原生质体应用。本发明具有较高重现性,可稳定获得高质量甘蔗茎组织原生质体,实现转化效率达到75%以上的效果。本发明为甘蔗茎特异基因与蛋白质亚细胞定位、启动子功能验证等分子生物学研究提供了有效的研究技术;且操作简便易行,可推广应用于其它高糖分含量物种的原生质体制备和瞬时转化,具有广泛应用价值。

    棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法

    公开(公告)号:CN113121683A

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN202110401802.3

    申请日:2021-04-14

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明涉及生物信息学与分子遗传学技术领域,尤其涉及棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法,通过分析棉花GraiRGA转录因子氨基酸序列后选取了长度为318个氨基酸的序列,经原核表达、新西兰大白兔免疫进行抗血清制备,再经抗原亲和纯化后,可以得到GraiRGA转录因子的特异结合抗体。本发明制得的GraiRGA抗体可用于GraiRGA转录因子的亚细胞定位研究,也可通过染色质免疫沉淀技术(ChIP)进行该转录因子在细胞中的染色质作用位点以及互作蛋白分析,为该转录因子介导的棉花抗逆机制研究提供重要工具,具有较高的应用价值和潜力。

    一种SsJMJ1基因在提高植物抗旱性中的应用

    公开(公告)号:CN114717258A

    公开(公告)日:2022-07-08

    申请号:CN202210514907.4

    申请日:2022-05-11

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种SsJMJ1基因在提高植物抗旱性中的应用,所述SsJMJ1基因为割手密的SsJMJ1基因;所述SsJMJ1基因cDNA序列如SEQ ID No.1所示;所述SsJMJ1基因所编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过分析具有较强抗旱特性的甘蔗野生种割手密发现,干旱胁迫下甘蔗多种组蛋白修饰发生显著变化,并且组蛋白去甲基化酶基因SsJMJ1在干旱胁迫下表达水平发生显著变化,通过体外和体内验证表明,提高SsJMJ1基因表达可增强植物耐旱性。由此可见,在具有较强抗旱性的甘蔗材料分离的SsJMJ1基因可作为提高植物抗旱的重要基因资源,具有作物抗旱育种应用潜力。

    一种具有增强子和启动子活性的甘蔗复合型顺式转录调控元件及筛选方法

    公开(公告)号:CN116376909B

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202211722667.3

    申请日:2022-12-30

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王凯 余光润 张会

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种具有增强子和启动子活性的甘蔗复合型顺式转录调控元件及筛选方法,该复合型顺式调控元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的顺式调控元件既可以驱动下游基因的表达,又可以通过增强启动子的转录活性来实现启动子下游基因表达增强,因此,该顺式调控元件同时具备增强子和启动子的转录调控活性。本发明的转录调控元件相较单一启动子或增强子元件具有更好的驱动基因转录效果,且相较常规的外源启动子而言具备更高的转化效率和稳定传递的潜力。

    一种SsGolS2基因在提高植物抗旱性中的应用

    公开(公告)号:CN115873889A

    公开(公告)日:2023-03-31

    申请号:CN202210428606.X

    申请日:2022-04-22

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王凯 韩苗苗 张会

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种SsGolS2基因在提高植物抗旱性中的应用,SsGolS2基因为割手密的SsGolS2基因,SsGolS2基因cDNA序列如SEQID NO.1所示;SsGolS2基因所编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示;SsGolS2基因在植物中高表达的方法是将含有SsGolS2基因的重组表达载体导入植物中。本发明证明割手密SES208中SsGolS2基因对提高植物抗旱能力有重要作用,SsGolS2基因可作为提高植物抗旱的重要基因资源,对于作物抗旱育种应用有重要意义和应用潜力。

    一种调控棉花花发育的类钙调素蛋白编码基因Goano03G1369

    公开(公告)号:CN115786363A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211170812.1

    申请日:2022-09-23

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种调控棉花花发育的类钙调素蛋白编码基因Goano03G1369,基因Goano03G1369序列如SEQ ID NO.1所示;本发明采用染色质免疫共沉淀与高通量测序方法将该基因精确定位于着丝粒区,且为着丝粒中与着丝粒特异组蛋白CenH3结合部位。不同组织转录组分析显示该基因仅在花组织中特异表达。该基因具有典型的EF手型结构域(EF‑hand domain),被注释为类钙调素蛋白(Calmodulin‑like proteins,CMLs)家族成员CML12的编码基因。结合上述证据,证明该基因在异常棉等棉属中具有潜在的生殖发育调控作用,在棉属物种的雄性不育新材料创制及杂交种应用中具潜在价值。

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