公开(公告)号：CN113640323A

公开(公告)日：2021-11-12

申请号：CN202111042231.5

申请日：2021-09-07

Applicant: 南通大学

Inventor： 刘芳 ,  李贵才 ,  徐佳炜 ,  王莹洁 ,  朱昌来 ,  张天一 ,  杨宇民

IPC: G01N23/04 ,  G01N1/30 ,  G01N1/36 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明提供一种少量细胞的透射电镜样品制备方法，涉及透射电镜技术领域，包含以下步骤：将细胞加入到EP管中，将收集的细胞加入预冷的戊二醛固定液中，EP管离心，取出上清液，加入1%琼脂糖凝胶，挑起细胞团块包裹在琼脂糖凝胶中，冷却至固定状态后，切割重新加入戊二醛固定液，使用二甲坤酸钠缓冲液清洗，乙醇逐级脱水；细胞浸透；将细胞样品逐步加温聚合，形成包埋块；对包埋块中细胞密集块区域打磨并切割成树脂小块；切成半薄切片，染色定位，打磨只剩目标区域后以目标区域以中心用钻石刀切超薄切片，得到透射电镜样品。上述制备方法，减少了离心的次数，从而避免了细胞形貌发生改变，能够真实反映细胞内部物质真实的形貌。

公开(公告)号：CN113150321A

公开(公告)日：2021-07-23

申请号：CN202110381529.2

申请日：2021-04-09

Applicant: 南通大学

Inventor： 刘芳 ,  李贵才 ,  徐佳炜 ,  梁云云 ,  杨宇民

IPC: C08J3/075 ,  C08F251/00 ,  C08F220/56 ,  C08F222/38 ,  A61L27/20 ,  A61L27/52 ,  A61L27/50 ,  C08L51/02

Abstract: 本发明公开了一种不同弹性壳聚糖/丙烯酰胺微纳米拓扑结构水凝胶的制备方法，包括如下步骤：壳聚糖溶液的制备；丙烯酰胺和不同浓度的双丙烯酰胺溶液的制备；过硫酸铵溶液的制备；不同弹性模量的壳聚糖/丙烯酰胺水凝胶的制备；壳聚糖/丙烯酰胺水凝胶微图形的神经移植物的制备。本发明水凝胶的力学强度和拓扑结构的沟槽宽度可控，表现出优良的诱导DRG神经元轴突的导向作用，可用于坐骨神经的断端再生，原材料成本低廉、操作工艺简单、条件容易控制等诸多优点，是一种具有广阔应用前景的生物材料。

公开(公告)号：CN111099166A

公开(公告)日：2020-05-05

申请号：CN202010007926.9

申请日：2020-01-06

Applicant: 南通大学

Inventor： 朱昌来 ,  贺小琴 ,  刘芳 ,  王莹洁 ,  张天一

IPC: B65D81/18

Abstract: 本发明提供一种适用于透射电镜生物组织样品前固定后远程寄送的样品盛放装置及其使用方法，样品盛放装置包括离心管和盛放篮，所述盛放篮设于离心管内，且盛放篮的底端和顶端抵接于离心管的管底和管盖之间，生物样品放置于盛放篮内，所述离心管内设有淹没盛放篮篮筐的预冷固定液。本发明能有效避免生物样品前固定后在运输过程中因运输包装的随意颠倒、摆放引起的样品脱离固定液环境及放置冰袋造成的样品内部冰晶形成而造成的样品超微结构失真。本发明能将生物样品全程淹没在固定液中，不会造成前述不利因素造成的样品超微结构的影响，确保后续实验结果的真实、可靠。

公开(公告)号：CN113654863A

公开(公告)日：2021-11-16

申请号：CN202111003683.2

申请日：2021-08-30

Applicant: 南通大学

Inventor： 朱昌来 ,  贺小琴 ,  刘小曼 ,  刘芳 ,  王莹洁

IPC: G01N1/28 ,  G01N1/30 ,  G01N1/36 ,  G01N1/40

Abstract: 本发明公开了一种透射电镜观察用原位体外培养细胞的样品处理方法，通过制备琼脂凝胶置于细胞培养板的孔底，并对琼脂凝胶进行酸化、漂洗及表面的阳离子活性处理，将待观察细胞接种于所得琼脂凝胶表面，在后续样品处理制备中，经过锇酸固定、漂洗后，用手术刀和显微镊切去含有细胞生长的琼脂凝胶块，转移至另一培养板中，进行后续脱水、渗透，并在胶囊型包埋板中进行样品包埋，随后进行常规的切片、染色及上机观察。该方法可以避免常规样品处理方式所造成的培养细胞原始生长位置的改变和超微结构变化，而使得对实验结果判断的谬造误；同时，对于培养细胞的原位电镜观察及研究相邻细胞间超微结构关系具有重要意义。

公开(公告)号：CN111081514A

公开(公告)日：2020-04-28

申请号：CN202010007915.0

申请日：2020-01-06

Applicant: 南通大学

Inventor： 朱昌来 ,  贺小琴 ,  刘芳 ,  王莹洁 ,  张天一

IPC: H01J37/20 ,  G01N1/30 ,  G01N1/42

Abstract: 本发明公开了一种用于远程寄送的透射电镜生物样品固定管,包括生物样品固定管本体，生物样品固定管本体上设有样品管空管，样品槽，带连杆多孔塑料片及管盖三部分，中空管部分为透明圆形塑料管，管口为螺口结构，管壁外表面标记有容量刻度线，内管壁近中下位置处有一圈隆起线，管底呈现弧形圆底或尖底，样品槽为一圆形或方形倒立帽状结构，深度为3mm的样品槽帽窝状槽底，用于盛放样品，该透射电镜生物样品固定管，可以解决现有组织样品在远程寄送过程中易出现样品脱离固定液环境粘璧现象而造成不能充分保持组织细胞的原有超微结构，本装置能将样品全程淹没在固定液中，不会造成样品超微结构的影响，确保后续实验结果的真实，可靠。