公开(公告)号：CN114606262A

公开(公告)日：2022-06-10

申请号：CN202210349828.2

申请日：2022-04-02

Applicant: 南昌大学抚州医学院

Inventor： 胡有生 ,  陈春香 ,  贾鹏 ,  饶泽昌 ,  肖星洋 ,  宋凯怡

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/54 ,  A61K48/00 ,  A61P31/12

Abstract: 本公开涉及生物技术领域，具体涉及一种基因敲除载体及其构建方法与用途。包括CRISPR/Cas9载体骨架与连接在所述载体骨架上的一段DNA片段，所述DNA片段能够特异性靶向编码斑马鱼PKR链接区的基因片段。该基因敲除载体能够精准敲除编码斑马鱼PKR链接区的基因片段，特别是能够精准敲除编码斑马鱼PKR链接区中包含碱性区在内的28个氨基酸的基因片段，使得斑马鱼体内能够表达有链接区碱性区缺失的PKR异构体，其单链RNA结合能力降低，特别是与5’端三磷酸的mRNA的结合能力降低，PKR被单链RNA活化降低，从而降低PKR抑制蛋白翻译的功能，有效促进蛋白质翻译过程，从而增强斑马鱼的抗病毒免疫相关蛋白的翻译，增强斑马鱼的抗病毒免疫功能。