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公开(公告)号：CN101565726A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910115452.3
申请日：2009-05-31
Applicant: 南昌大学
Abstract: 使用纳米脂质体免疫佐剂制备抗小分子物质抗体的方法，属于免疫学技术领域，先将大豆卵磷脂和胆固醇以1.8－2.5/1的重量比混匀，再以W/V为1/500－800的比例溶解于二氯甲烷溶剂中，加入烧瓶，旋转蒸发器上35－40℃减压蒸干；然后加入浓度为1.5－2.0mg/mL、与包埋材料的物料比为2.0－2.5/1的抗原溶液，强烈晃动，其中缓冲液用pH＝6.8－7.2的20mM的PBS；以每次200－300μg/只小鼠的量进行静脉注射免疫；二次加强免疫；选择特异性抗体效价高的小鼠用于细胞融合实验，筛选所需要的单克隆抗体。本发明：①包埋材料物相容性好，在动物体内易被降解、无毒性；②脂质体进入外周血分布到淋巴结和中枢免疫器官，迅速被免疫细胞捕获实现抗原提呈；③抗原被包埋在脂质体内部，增加抗原的稳定性，确保免疫效果。
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公开(公告)号：CN101555512A
公开(公告)日：2009-10-14
申请号：CN200910115192.X
申请日：2009-04-16
Applicant: 南昌大学
Abstract: 特异性结合伐地那非及其结构类似物的单克隆抗体的制备，包括人工免疫抗原、人工检测抗原的合成、免疫小鼠、单克隆抗体的筛选、单克隆抗体的结构特异性鉴定，把M－BSA和伐地那非混合，调节pH，加入戊二醛连接剂；磁力搅拌器缓慢搅拌反应；用蒸馏水透析，冷冻真空干燥，合成得人工免疫抗原；把M－OVA和伐地那非混合，调节pH，加入戊二醛连接剂；磁力搅拌器缓慢搅拌反应；用蒸馏水透析，冷冻真空干燥，合成得人工检测抗原；以竞争抑制ELISA方法检测单克隆抗体对伐地那非和piperidenafil的交叉反应，鉴别出交叉反应率大的、能够特异性结合伐地那非及其结构类似物的单克隆抗体。本发明制备的单克隆抗体对伐地那非及其结构类似物的亲和力平衡常数大于109M－1。
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公开(公告)号：CN101654480A
公开(公告)日：2010-02-24
申请号：CN200910115824.2
申请日：2009-08-27
Applicant: 南昌大学
IPC: C07K14/765 , C07K1/113 , C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 一种使用还原糖修饰载体蛋白制备突出喹诺酮药品母核人工免疫抗原的方法，①葡萄糖和乳糖等量，再按两者总量与载体蛋白以(20-25)∶1摩尔比混合，调pH到9.0-9.5，40-42℃摇床反应2-4小时，修饰载体蛋白；②把载体蛋白、戊二醛、环丙沙星以1∶(20-25)∶(90-120)摩尔比混合，调pH到9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，使用pH为7.2-7.4的0.01M PBS充分透析，制备出环丙沙星人工抗原，本发明使用还原糖对载体基团的氨基进行修饰掩蔽，减少了在人工抗原偶联小分子物质的化学反应过程中产生的副反应，而使用还原糖与氨基反应修饰载体蛋白质，使结合小分子的人工抗原成为免疫原性最强的糖蛋白，从而使人工抗原的免疫原性得到增强，增加免疫过程中抗原提呈的效率，有利于产生高效价的特异性抗体。
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公开(公告)号：CN101643506A
公开(公告)日：2010-02-10
申请号：CN200910115825.7
申请日：2009-08-27
Applicant: 南昌大学
IPC: C07K14/765 , C07K14/795 , C07K1/113 , C12N15/06 , C12P21/08
Abstract: 特异性结合西布曲明及去甲基西布曲明的单克隆抗体的制备，包括免疫抗原合成、检测抗原合成、免疫小鼠、单克隆抗体筛选、单克隆抗体结构特异性鉴定，免疫抗原合成为：①按照葡萄糖和乳糖与牛血清白蛋白的摩尔比都为20-25∶1混合，pH调至9.0-9.5，40-42℃摇床反应2小时；②修饰化牛血清白蛋白、戊二醛、去甲基西布曲明以1∶(25-30)∶(80-90)的摩尔比混合，pH调至9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，pH7.2-7.4、0.01M PBS溶液中4℃充分透析；检测抗原合成为：卵清蛋白、戊二醛、甲基西布曲明西布曲明以1∶(15-20)∶(60-75)的摩尔比例混合，pH调至9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，pH7.2-7.4、0.01M PBS溶液中4℃充分透析，本发明灵敏度高、特异性强、方便快捷、操作简单、成本低廉，无需借助昂贵的设备。
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