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公开(公告)号:CN120060114A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510290687.5
申请日:2025-03-12
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明提供了一种细胞核骨架原位分离方法,涉及生物分离技术领域。本发明提供的原位分离方法包括:对待分离的细胞进行贴壁培养后吸弃培养液并清洗,使用分离液在冰上处理1h‑3h并清洗,得细胞原位核骨架;所述分离液包括0.1%‑2%的分离剂及浓度15μL/mL‑25μL/mL的酶抑制剂,所述酶抑制剂包括丝氨酸蛋白酶抑制剂、蛋白质酶抑制剂、磷酸蛋白酶抑制剂。本发明能够简单高效地分离完整的细胞核骨架,能够更加准确地探测细胞核的生物力学性质,同时为体外研究基因动态表达提供重要工具。
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公开(公告)号:CN120060115A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510290869.2
申请日:2025-03-12
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明提供了一种细胞核纤层原位分离方法,涉及生物分离技术领域。本发明提供的原位分离方法包括对待分离的细胞进行贴壁培养后吸弃培养液并清洗,使用分离液在冰上处理1h‑3h并清洗得核骨架,使用固定液对核骨架进行固定后,使用清洗液进行清洗得细胞原位核纤层;所述分离液包括0.1%‑2%的分离剂及浓度15μL/mL‑25μL/mL的酶抑制剂;所述固定液包括0.5%‑3%的固定剂,所述固定剂包括戊二醛、锇酸;所述清洗液包括10%‑100%的清洗剂,所述清洗剂包括乙醇。本发明能够更加简单地获取结构完整的纤层,便于探测在生理状态下的核纤层结构。
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公开(公告)号:CN118667750A
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410845604.X
申请日:2024-06-27
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明公开了一种简单高效分离完整细胞核的方法,属于生物分离技术领域。本发明方法包括以下步骤:1)在贴壁状态下用A液破碎并去除细胞核以外的细胞结构或成分使得瓶壁上只剩下贴壁的细胞核,2)在悬液状态或贴壁状态下用B液破碎细胞核,3)离心,获得核蛋白。本发明提供的分离方法简单、快速、获得的细胞核更完整、细胞核蛋白纯度更高,整个细胞核分离、纯化过程耗时不到1.5小时,可应用于试剂盒中。
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