一种基于酶切辅助无标记适体传感器的ATP化学发光检测方法

    公开(公告)号:CN112067602A

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN202010834990.4

    申请日:2020-08-19

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于酶切辅助无标记适体传感器的ATP化学发光检测方法,首先将适体固定在磁性微球表面,再将适体与三磷酸腺苷特异性结合,然后利用核酸外切酶T能够特异地将单链DNA从3’端逐步降解为游离的碱基,基于外切酶可以显著降低背景信号,得到磁性微球表面检测适体的量与待测ATP浓度的量化关系;最后对适体传感器进行化学发光检测。本发明基于ATP适体链上的鸟嘌呤碱基(G)与化学发光试剂苯甲酰甲醛(PG)间的瞬时衍生化反应产生化学发光的原理,省去了其他化学放光标记物的标记环节,在保证灵敏度的基础上简化了操作步骤,缩短了检测时间,再加之所用化学发光分析法线性范围宽、设备简单、易操作,因此有望实现全自动化检测。

    一种基于酶切辅助无标记适体传感器的ATP化学发光检测方法

    公开(公告)号:CN112067602B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN202010834990.4

    申请日:2020-08-19

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于酶切辅助无标记适体传感器的ATP化学发光检测方法,首先将适体固定在磁性微球表面,再将适体与三磷酸腺苷特异性结合,然后利用核酸外切酶T能够特异地将单链DNA从3’端逐步降解为游离的碱基,基于外切酶可以显著降低背景信号,得到磁性微球表面检测适体的量与待测ATP浓度的量化关系;最后对适体传感器进行化学发光检测。本发明基于ATP适体链上的鸟嘌呤碱基(G)与化学发光试剂苯甲酰甲醛(PG)间的瞬时衍生化反应产生化学发光的原理,省去了其他化学放光标记物的标记环节,在保证灵敏度的基础上简化了操作步骤,缩短了检测时间,再加之所用化学发光分析法线性范围宽、设备简单、易操作,因此有望实现全自动化检测。

    一种不同环境污染物造成DNA损伤的化学发光体外评价方法

    公开(公告)号:CN112067817A

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN202010835076.1

    申请日:2020-08-19

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种不同环境污染物造成DNA损伤的化学发光体外评价方法,该技术方案以磁性微球作为载体,将富含G碱基的DNA作为固定相固定于磁性微球表面。采用Fenton试剂在反应中产生的具有强氧化能力的·OH将G碱基氧化为8‑OHdG,再利用抗体的特异识别,就可以检测DNA上受到氧化损伤产生的8‑OHdG量,从而建立8‑OHdG与磁性微球上结合的抗体量的关系。利用抗体上修饰有HRP能产生化学发光信号,建立DNA上受到氧化损伤产生的8‑OHdG与化学发光强度的对应关系,从而得到氧化产生的8‑OHdG量与化学发光强度的量化关系,间接实现8‑OHdG的定量分析检测,而且大大提高了检测灵敏度和精密度。

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