公开(公告)号：CN115820602A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202210903472.2

申请日：2022-07-27

Applicant: 南方科技大学

Inventor： 崔欢欢 ,  陈炜 ,  陈瑞 ,  史心瑶

IPC: C12N9/22 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  A61K48/00 ,  A61K38/46

Abstract: 本发明公开一种融合蛋白及其应用，所述融合蛋白包括dCas9蛋白、激活子和无序区，其中，所述dCas9蛋白为失去内切酶活性的Cas9蛋白，用以在向导RNA的介导下，将所述融合蛋白精准地定位到目的基因转录起始位点前100～300碱基对的位置；所述激活子用以招募共调控因子并激活目的基因的转录；所述无序区为一段柔性蛋白序列，用以介导形成液‑液相分离。本发明通过在CRISPR/Cas9系统中引入相分离机制，利用蛋白无序区介导相分离，使得生物分子快速聚集并在局部形成高浓度，由此来提高CRISPR/Cas9系统的调控效率，能够更高效的激活基因表达，且介导基因激活精准、特异性高，同时使用成本低、操作方法简单。

公开(公告)号：CN112280829A

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN202011200481.2

申请日：2020-10-30

Applicant: 南方科技大学

Inventor： 方亮 ,  陈炜 ,  崔欢欢 ,  朱琼花 ,  胡宇慧 ,  李贵鹏

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明技术方案通过设计一种试剂盒，该试剂盒包括带有生物素标记的样本标签序列，样本标签序列带有特异标记样本的条形码核苷酸序列，还包括生物素标记的刀豆蛋白A或其类似物，以及用于连接样本标签序列和刀豆蛋白A或其类似物的亲和素，在单细胞测序混合样本之前，使用试剂盒对样本进行预处理，使得连接有样本标签序列的刀豆蛋白A或其类似物连接在细胞膜或细胞核膜上，从而使每个样本的细胞带有不同的样本标签序列，从而在后续的单细胞测序结果中能够清楚的分辨出细胞来自哪个样本，该方案操作简单，成本低，效果好，且能通用于细胞和细胞核的标记，降低单细胞测序的成本。

公开(公告)号：CN112280829B

公开(公告)日：2023-12-26

申请号：CN202011200481.2

申请日：2020-10-30

Applicant: 南方科技大学

Inventor： 方亮 ,  陈炜 ,  崔欢欢 ,  朱琼花 ,  胡宇慧 ,  李贵鹏

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明技术方案通过设计一种试剂盒，该试剂盒包括带有生物素标记的样本标签序列，样本标签序列带有特异标记样本的条形码核苷酸序列，还包括生物素标记的刀豆蛋白A或其类似物，以及用于连接样本标签序列和刀豆蛋白A或其类似物的亲和素，在单细胞测序混合样本之前，使用试剂盒对样本进行预处理，使得连接有样本标签序列的刀豆蛋白A或其类似物连接在细胞膜或细胞核膜上，从而使每个样本的细胞带有不同的样本标签序列，从而在后续的单细胞测序结果中能够清楚的分辨出细胞来自哪个样本，该方案操作简单，成本低，效果好，且能通用于细胞和细胞核的标记，降低单细胞测序的成本。

公开(公告)号：CN116103368A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202210914546.2

申请日：2022-07-29

Applicant: 南方科技大学

Inventor： 崔欢欢 ,  陈炜 ,  甘迪文

IPC: C12Q1/6806 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明提供一种3’mRNA测序文库的构建方法，包括以下步骤：提供目标RNA；构建逆转录体系，对所述目标RNA进行逆转录，得到mRNA‑cDNA杂合链；往经过所述逆转录的所述逆转录体系中，加入转座酶，转座反应后，得到多个接头mRNA‑cDNA杂合链片段；将多个所述接头mRNA‑cDNA杂合链中的RNA降解，得到多个cDNA链；采用扩增引物对多个所述cDNA链进行扩增后，得到所述3’mRNA测序文库。在本发明中，通过采用转座酶将杂合链快速碎片化并连接接头，用以后续标记序列的连接，操作便捷快速；同时，将转座酶与逆转录反应体系混合反应，利用没有失活的逆转录酶将碎片化的杂合链补平，省略了传统的补平步骤，以此在保证富集程度的同时进一步提高建库效率。