公开(公告)号：CN103255202A

公开(公告)日：2013-08-21

申请号：CN201210037697.0

申请日：2012-02-20

Applicant: 南开大学

Inventor： 王林同 ,  朱琳 ,  明红霞 ,  王轲

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: Y02A50/451 ,  Y02A50/52

Abstract: 本发明属于环境科学水体病原菌检测领域，通过基因片段的体外酶促扩增，快速检测水样中的霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌，评价并预警海洋环境这三种致病菌的含量及污染情况。霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是三种常见的革兰氏阴性弧菌，在海洋环境中广泛分布，能感染人类，通过粪口途径在人群中传播。PCR技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时省力等优点。三重PCR在单一PCR基础上，向同一反应体系中加入三对引物，同时扩增出三段DNA片段，这样更加节省了时间和成本。建立三重PCR方法用于快速检测样品中的病原微生物具有重要的实际意义和应用价值，因而越来越受到人们的关注。

公开(公告)号：CN102732599A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201110090819.8

申请日：2011-04-12

Applicant: 南开大学

Inventor： 王林同 ,  朱琳 ,  王轲 ,  明红霞

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: Y02A50/451

Abstract: 双重聚合酶链反应方法检测海水样品中的创伤弧菌和副溶血弧菌，属于环境科学水体病原微生物检测领域。根据创伤弧菌和副溶血弧菌的保守序列，设计两对退火温度基本相同的引物。将两对引物和两种细菌的DNA模板加入到同一个反应体系中，经过几十次变性、退火、延伸的循环，使目的基因扩增几十甚至几百万倍，即可很容易检测到目的基因的存在，从而同时检测水样中是否存在创伤弧菌或副溶血弧菌。相比于传统方法，本发明特异性强、灵敏度高，且操作简便快捷，又节省时间人力和成本。除此之外，本发明检测的两种细菌都是海洋中十分常见的病原微生物，使这项技术具有实际意义和应用价值，适于推广。