公开(公告)号：CN112029785A

公开(公告)日：2020-12-04

申请号：CN201910475504.1

申请日：2019-06-03

Applicant: 南开大学

Inventor： 李明刚 ,  杨星楷 ,  刘奇奇

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A61K38/26 ,  A61K38/48 ,  A61P3/10 ,  A61P7/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生产降糖抗栓肽(5rolGLP-1-NK)工程菌的构建、制备方法和应用技术。将可防治2型糖尿病的口服长效促胰岛素(rolGLP-1)和防治其血栓并发症的纳豆激酶(NK)融合，使其具有防治糖尿病及其血栓并发症的双重功能。具体是应用基因工程技术获得rolGLP-1和NK的融合基因5rolGLP-1-NK，构建其表达载体pET-22b(+)-5rolGLP-1-NK并转化大肠杆菌，筛选获得高效表达5rolGLP-1-NK的工程菌BL21(DE3)-5rolGLP-1-NK。该菌株通过诱导表达和纯化可获得高纯度5rolGLP-1-NK。尾部血栓模型小鼠灌胃5rolGLP-1-NK，可显著减缓其尾部血栓出现的时间和程度；糖尿病模型小鼠灌胃5rolGLP-1-NK，可明显降低血糖水平并改善糖尿病症状，因此，本发明可用于开发同时治疗糖尿病及其血栓并发症的双功能降糖抗栓肽药物。