公开(公告)号：CN1865430A

公开(公告)日：2006-11-22

申请号：CN200510013514.1

申请日：2005-05-16

Applicant: 南开大学

Inventor： 李明刚 ,  侯建华 ,  方园园 ,  薄涛 ,  王翠艳 ,  杨少辉 ,  武志强 ,  闫瑞香

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N15/10 ,  C07H21/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种高产促胰岛素激素毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌及其构建方法。本发明运用分子生物学技术先构建毕赤酵母(P.pastoris)表达载体pPIC9GLP－1，然后将其线性化后转化进入毕赤酵母GS115中，从而获得能够高效分泌表达促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌，该工程菌的促胰岛素激素产量可达到100mg/L。同时，利用该高产工程菌生产的促胰岛素激素产品，其氨基酸序列不同于天然产品，且已被消除了胰蛋白酶切位点，因此不仅在体内不会被特异性的蛋白酶降解而能够长时间的保持活性，而且由于不会被胰蛋白酶降解，还可以制成口服制剂使用。

公开(公告)号：CN100497591C

公开(公告)日：2009-06-10

申请号：CN200510013514.1

申请日：2005-05-16

Applicant: 南开大学

Inventor： 李明刚 ,  侯建华 ,  方园园 ,  薄涛 ,  王翠艳 ,  杨少辉 ,  武志强 ,  闫瑞香

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N15/10 ,  C07K14/575 ,  C07H21/00 ,  C12R1/84 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种高产促胰岛素激素毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌及其构建方法。本发明运用分子生物学技术先构建毕赤酵母(P.pastoris)表达载体pPIC9GLP-1，然后将其线性化后转化进入毕赤酵母GS115中，从而获得能够高效分泌表达促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌，该工程菌的促胰岛素激素产量可达到100mg/L。同时，利用该高产工程菌生产的促胰岛素激素产品，其氨基酸序列不同于天然产品，且已被消除了胰蛋白酶切位点，因此不仅在体内不会被特异性的蛋白酶降解而能够长时间的保持活性，而且由于不会被胰蛋白酶降解，还可以制成口服制剂使用。