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公开(公告)号:CN1212331C
公开(公告)日:2005-07-27
申请号:CN03130540.7
申请日:2003-08-08
Applicant: 南开大学 , 天津科润农业科技股份有限公司蔬菜研究所 , 天津市农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明涉及一种马铃薯病毒RNA的提取方法。它包括将马铃薯茎或叶片组织放入冰预冷的灭菌匀浆器或研钵中研磨成匀浆,加入提取缓冲液(Tris-HCl pH8.0 100mmol/L,NaCl 100mmol/L,EDTA 10mmol/L)和β-巯基乙醇,混匀,加入水饱和酚,氯仿/异戊醇,室温离心,水相中加入NaAc(3mol/L,pH5.2)和等体积的异丙醇,-20℃中沉淀3小时;70%的乙醇洗涤沉淀,用无菌双蒸馏水充分溶解等步骤。本发明省去了对器皿的高温烘烤或DEPC处理,实验用蒸馏水亦不需DEPC处理。材料的粉碎只需在冰予冷的器皿中进行。全部提取过程均可在常温下进行。所得到的RNA经RT-PCR检测及序列分析,序列完整,没有降解。该技术可用于生产上大规模的马铃薯病毒RT-PCR检测。
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公开(公告)号:CN1757302A
公开(公告)日:2006-04-12
申请号:CN200510015879.8
申请日:2005-11-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种生态处理过期食品制造蝇蛆蛋白的方法。利用家蝇幼虫作为生物反应器将过期食品中废弃蛋白质转化成为可提供饲料食品加工使用的蝇蛆蛋白包括过期食品处理蝇培养蝇卵收集蝇卵接种蝇蛆分离蝇蛆蛋白等工序达到了过期食品减量化无害化处理和资源化利用的目的。所得幼虫蛋白质含量为58%~62%,转化率分别为:奶制品:24%~29%,肉制品:28%~30%,水产品:27%~30%,谷物废弃物:23%~32%本发明提高了食物链的生物效能,具有良好的社会效益、经济效益和环境效益。
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公开(公告)号:CN1473839A
公开(公告)日:2004-02-11
申请号:CN03130540.7
申请日:2003-08-08
Applicant: 南开大学 , 天津科润农业科技股份有限公司蔬菜研究所 , 天津市农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明涉及一种马铃薯病毒RNA的提取方法。它包括将马铃薯茎或叶片组织放入冰预冷的灭菌匀浆器或研钵中研磨成匀浆,加入提取缓冲液(Tris-HCl pH8.0100mmol/L,NaCl 100mmol/L,EDTA 10mmol/L)和β-巯基乙醇,混匀,加入水饱和酚,氯仿/异戊醇,室温离心,水相中加入NaAc(3mol/L,pH5.2)和等体积的异丙醇,-20℃中沉淀3小时;70%的乙醇洗涤沉淀,用无菌双蒸水充分溶解等步骤。本发明省去了对器皿的高温烘烤或DEPC处理,实验用蒸馏水亦不需DEPC处理。材料的粉碎只需在冰预冷的器皿中进行。全部提取过程均可在常温下进行。所得到的RNA经RT-PCR检测及序列分析,序列完整,没有降解。该技术可用于生产上大规模的马铃薯病毒RT-PCR检测。
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公开(公告)号:CN100360049C
公开(公告)日:2008-01-09
申请号:CN200510015879.8
申请日:2005-11-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种生态处理过期食品制造蝇蛆蛋白的方法。利用家蝇幼虫作为生物反应器将过期食品中废弃蛋白质转化成为可提供饲料食品加工使用的蝇蛆蛋白。包括过期食品处理、蝇培养、蝇卵收集、蝇卵接种、蝇蛆分离、蝇蛆蛋白等工序。达到了过期食品减量化、无害化处理和资源化利用的目的。所得幼虫蛋白质含量为58%~62%,转化率分别为:奶制品:24%~29%,肉制品:28%~30%,水产品:27%~30%,谷物废弃物:23%~32%。本发明提高了食物链的生物效能,具有良好的社会效益、经济效益和环境效益。
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公开(公告)号:CN1570146A
公开(公告)日:2005-01-26
申请号:CN200410019091.X
申请日:2004-04-28
Applicant: 南开大学 , 天津科润农业科技股份有限公司 , 天津市农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测马铃薯病毒的试剂盒及检测方法,该试剂盒由反应液、引物、酶液及阳性标准品组成,反应液由鼠源逆转录酶反应缓冲液、PCR反应缓冲液、dNTPs及灭菌水组成,引物为马铃薯病毒引物,阳性标准品为马铃薯病毒克隆质粒,酶液由鼠源逆转录酶、TaqDNA聚合酶、灭菌水组成,该检测方法是:从植物组织中提取总RNA;对总RNA进行一步法逆转录-PCR反应;PCR产物经电泳检测,本发明省去了现有方法中,先逆转录再PCR的步骤,节省时间并降低了试剂成本,并有特异性强,灵敏度高,结果准确,不需要大型设备仪器,操作简单,检测速度快,无放射性污染,价格低廉等优点。
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公开(公告)号:CN1100149C
公开(公告)日:2003-01-29
申请号:CN99123085.X
申请日:1999-12-10
Abstract: 本发明属马铃薯纺锤块茎类病毒的检测方法,本发明是利用Taq酶在PCR扩增体系内将类病毒RNA反转录为cDNA,同时完成cDNA扩增,用琼脂糖电泳检测扩增产物,判断病毒的有无。本发明检测速度快,可同时检测数十个样品;灵敏度高,可检测到纳克级的病毒RNA;特异性强,由于引物的特异性,只能特异性地扩增病毒cDNA;廉价,Taq的价格远远低于反转录酶。
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公开(公告)号:CN1256318A
公开(公告)日:2000-06-14
申请号:CN99123085.X
申请日:1999-12-10
Abstract: 本发明属马铃薯纺锤块茎类病毒的检测方法,本发明是利用Taq酶在PCR扩增体系内将类病毒RNA反转录为cDNA,同时完成cDNA扩增,用琼脂糖电泳检测扩增产物,判断病毒的有无。本发明检测速度快,可同时检测数十个样品;灵敏度高,可检测到纳克级的病毒RNA;特异性强,由于引物的特异性,只能特异性地扩增病毒cDNA;廉价,Taq的价格远远低于反转录酶。
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公开(公告)号:CN1145412C
公开(公告)日:2004-04-14
申请号:CN00136260.7
申请日:2000-12-26
Applicant: 南开大学 , 天津大学 , 大港油田集团有限责任公司
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明为一种工厂化养殖家蝇的方法,包括种蝇的三级扩繁,蛹期灭菌,幼虫的饲料中重金属含量铅、汞、铬含量小于2μg/g,镉、砷的含量小于0.2μg/g。本发明可获得优良种群,所生产的蝇蛆为无致病菌、低重金属含量的优质产品。
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公开(公告)号:CN1360824A
公开(公告)日:2002-07-31
申请号:CN00136260.7
申请日:2000-12-26
Applicant: 南开大学 , 天津大学 , 大港油田集团有限责任公司
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明为一种工厂化养殖家蝇的方法,包括种蝇的三级扩繁,蛹期灭菌,幼虫的饲料中重金属含量铅、汞、铬含量小于2μg/g,镉、砷的含量小于0.2μg/g。本发明可获得优良种群,所生产的蝇蛆为无致病菌、低重金属含量的优质产品。
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