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公开(公告)号：CN1560254A
公开(公告)日：2005-01-05
申请号：CN200410018706.7
申请日：2004-03-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种L－乳酸脱氢酶基因、包括该基因的重组载体及其宿主细胞，L－乳酸脱氢酶基因具有序列表中SEQ ID No.5所述的核苷酸序列；一种包括L－乳酸脱氢酶基因的重组载体，通过PCR扩增出的L－乳酸脱氢酶的开放阅读框架，回收得到951bpDNA片段，与pGEM－T Easy或pET－28a(+)加入T4连接酶，进行连接反应，制成重组载体pLZD3084，或pLOD3083，将重组载体转化到宿主大肠杆菌的细胞中，得到重组微生物，在本发明的基础上，可进一步研究L－乳酸脱氢酶基因的缺失，缺失L－乳酸脱氢酶基因的乳杆菌将可以发酵生产高光学纯度的D－乳酸，从而可以大大降低D－乳酸的生产成本。
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公开(公告)号：CN1546667A
公开(公告)日：2004-11-17
申请号：CN200310107150.4
申请日：2003-12-02
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及D－型乳酸脱氢酶基因、含有该基因的重组载体及用该载体转化的宿主细胞，特别是涉及构建生产L－乳酸的基因工程技术。自然界中存在L和D两种乳酸脱氢酶，如果D－乳酸脱氢酶缺失，就可以得到纯度为100％的L－乳酸。D－乳酸脱氢酶广泛存在于微生物中，但目前只有少数乳杆菌属的D－乳酸脱氢酶基因被克隆和测序。本发明的技术方案：从乳杆菌MD－1中提取基因组DNA，构建有D－乳酸脱氢酶基因的重组载体、D－乳酸脱氢酶克隆载体；克隆载体转化到大肠杆菌中，得到重组微生物。在本发明完成的基础上，可以进一步研究D－乳酸脱氢酶基因的缺失，那么，缺失D－乳酸脱氢酶基因的乳杆菌MD－1将可以发酵生产高光学纯度的L－乳酸，从而可以大大降低L－乳酸的生产成本。
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公开(公告)号：CN1252271C
公开(公告)日：2006-04-19
申请号：CN200310107150.4
申请日：2003-12-02
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及D-型乳酸脱氢酶基因、含有该基因的重组载体及用该载体转化的宿主细胞，特别是涉及构建生产L-乳酸的基因工程技术。自然界中存在L和D两种乳酸脱氢酶，如果D-乳酸脱氢酶缺失，就可以得到纯度为100%的L-乳酸。D-乳酸脱氢酶广泛存在于微生物中，但目前只有少数乳杆菌属的D-乳酸脱氢酶基因被克隆和测序。本发明的技术方案：从乳杆菌MD-1中提取基因组DNA，构建有D-乳酸脱氢酶基因的重组载体、D-乳酸脱氢酶克隆载体；克隆载体转化到大肠杆菌中，得到重组微生物。在本发明完成的基础上，可以进一步研究D-乳酸脱氢酶基因的缺失，那么，缺失D-乳酸脱氢酶基因的乳杆菌MD-1将可以发酵生产高光学纯度的L-乳酸，从而可以大大降低L-乳酸的生产成本。
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公开(公告)号：CN1245515C
公开(公告)日：2006-03-15
申请号：CN200410018706.7
申请日：2004-03-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种L-乳酸脱氢酶基因、包括该基因的重组载体及其宿主细胞，L-乳酸脱氢酶基因具有序列表中SEQ ID No.5所述的核苷酸序列；一种包括L-乳酸脱氢酶基因的重组载体，通过PCR扩增出的L-乳酸脱氢酶的开放阅读框架，回收得到968bpDNA片段，与pGEM-T Easy加入T4连接酶，进行连接反应，制成重组载体pLZD3084，将重组载体转化到宿主大肠杆菌的细胞中，得到重组微生物，在本发明的基础上，可进一步研究L-乳酸脱氢酶基因的缺失，缺失L-乳酸脱氢酶基因的乳杆菌将可以发酵生产高光学纯度的D-乳酸，从而可以大大降低D-乳酸的生产成本。
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