乙型肝炎病毒X蛋白转导系统表达载体及其构建

    公开(公告)号:CN1546668A

    公开(公告)日:2004-11-17

    申请号:CN200310107316.2

    申请日:2003-12-12

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种乙型肝炎病毒X蛋白转导系统表达载体及其构建,是通过人乙肝病毒的X基因与pTAT-GFP载体构建重组质粒pTAT-GFP-X,构建的pTAT-GFP-X重组质粒可表达含有乙型肝炎病毒X蛋白的融合蛋白;经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导可大量表达融合蛋白;可以通过6组氨酸(His6)进行纯化;TAT多肽具有能够穿过细胞膜的结构,利用该功能本发明可以使HBx蛋白导入细胞;本发明将HBx蛋白导入细胞后,可通过GFP检测导入效率和胞内示踪;本发明在进行蛋白转导细胞实验时,可实现HBx蛋白的“定量”导入,本发明可详细地研究乙肝病毒X蛋白的致病作用。

    高转移倾向的人乳腺癌细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN1236055C

    公开(公告)日:2006-01-11

    申请号:CN03130264.5

    申请日:2003-06-27

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及癌细胞系,特别是一种高转移倾向的人乳腺癌细胞系及其建立的方法,属动物细胞系领域。有关肿瘤的侵袭与移转的机制目前尚不十分清楚。需要建立肿瘤转移动物模型对其进行深入的研究。以往在肿瘤转移动物模型中应用裸鼠,在本发明中,我们采用SCID小鼠作为实验对象,取乳腺癌亲本MCF-7细胞悬液(5×107/0.2ml)皮下接种于SCID小鼠肩部,接种MCF-7细胞68天后,将SCID鼠处死,取出肺脏,进行原代培养,当由组织块中长出的细胞能够长满培养瓶底部后,进行细胞传代,将该细胞命名为LM-MCF-7。当LM-MCF-7细胞体外培养20代后,将瘤细胞再回注到SCID鼠皮下,方法同前;成瘤率达到100%(5/5只),并且在SCID鼠的肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器出现广泛转移。

    乳腺癌转移相关基因基因芯片的建立及其建立方法

    公开(公告)号:CN101008034A

    公开(公告)日:2007-08-01

    申请号:CN200610130107.3

    申请日:2006-12-13

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种乳腺癌转移相关基因基因芯片的建立及其建立方法,该方法制备的基因芯片中包含的基因共有218个,其中有应用我们建立的高转移倾向的人乳腺癌细胞系LM-MCF-7细胞系(获国家发明专利,ZL 03130264.5)与人乳腺癌细胞MCF-7相比较获得的乳腺癌转移相关基因和文献报道的乳腺癌转移相关基因。合成218个基因的寡核苷酸(oligo),将该分子探针分别点制在经过氨基修饰的载玻片上。所制备的乳腺癌转移相关基因基因芯片主要用于抗乳腺癌转移药物的筛选,同时阐明其药物作用的分子机理,还可应用于乳腺癌转移的早期诊断、辅助个体化治疗方案及预后判断等。

    乳腺癌转移中参与分化等作用基因的分离及分离方法

    公开(公告)号:CN1810987A

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200510013151.1

    申请日:2005-01-28

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选在乳腺癌转移中参与分化、发育、信号转导和应激反应等作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仪可随时无限量培养获得,且由于实验样本的细胞成分均一,保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些相关的基因,这些基因的表达和功能的确认,在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面,都将有着重要的实际应用价值。

    乳腺癌转移中参与转录调节作用基因的分离及分离方法

    公开(公告)号:CN1810984A

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200510013156.4

    申请日:2005-01-28

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选筛选乳腺癌转移中参与转录调节作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仅可随时无限量培养获得,且由于实验样本的细胞成分均一,保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些在乳腺癌转移中参与转录调节作用的基因,这些基因的表达和功能的确认,在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面,都将有着重要的实际应用价值。

    人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN1252259C

    公开(公告)日:2006-04-19

    申请号:CN200410019057.2

    申请日:2004-04-20

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法,所述人肝癌转移亚克隆细胞系是用下述方法建立的:将人肝癌细胞H7402单细胞悬液接种于SCID鼠;确认转移部位为肺脏;原代培养;传代培养,当细胞传代到第三代以后,将培养液中的胎牛血清浓度降为10%,细胞生长良好,形态逐渐均一,即建立了一种来源于亲本人肝癌细胞H7402的肝癌转移亚克隆细胞系,并与亲本细胞形成配对关系,为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料;可用于筛选肝癌转移相关基因;可用于筛选肝癌转移相关蛋白;可用于筛选抗肿瘤转移药物;可用于肿瘤转移分子机理的研究;可用于进行肿瘤转移DNA疫苗的研究。

    一种骨髓间充质干细胞的分离及培养方法

    公开(公告)号:CN1699557A

    公开(公告)日:2005-11-23

    申请号:CN200510013557.X

    申请日:2005-05-26

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种骨髓间充质干细胞的分离及培养方法,与以往的方法相比,本法操作更为简便,同时由于采用了部分换液的方法,从而使培养细胞所需时间缩短,分离得到的间充质干细胞纯度较高,增殖较快。本发明方法所得细胞形态均一,呈长梭形,传代后,在8代以内的细胞贴壁能力较强,生长速度较快。间充质干细胞来源有限,本方明方法为间充质干细胞的研究和应用提供了丰富的材料来源。

    乳腺癌转移中参与细胞凋亡作用基因的分离及分离方法

    公开(公告)号:CN1810982A

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200510013154.5

    申请日:2005-01-28

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选在乳腺癌转移中参与细胞凋亡作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仅可随时无限量培养获得,且由于实验样本的细胞成分均一,保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些参与细胞凋亡作用的基因,这些基因的表达和功能的确认,在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面,都将有着重要的实际应用价值。

    乳腺癌转移中参与新陈代谢作用基因的分离及分离方法

    公开(公告)号:CN1810981A

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200510013153.0

    申请日:2005-01-28

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选乳腺癌转移中参与新陈代谢作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仅可随时无限量培养获得,且由于实验样本的细胞成分均一,保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些在乳腺癌转移中参与新陈代谢作用的基因,这些基因的表达和功能的确认,在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面,都将有着重要的实际应用价值。

    人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN1563376A

    公开(公告)日:2005-01-12

    申请号:CN200410019057.2

    申请日:2004-04-20

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了一种人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法,所述人肝癌转移亚克隆细胞系是用下述方法建立的:将人肝癌细胞H7402单细胞悬液接种于SCID鼠;确认转移部位为肺脏;原代培养;传代培养,当细胞传代到第三代以后,将培养液中的胎牛血清浓度降为10%,细胞生长良好,形态逐渐均一,即建立了一种来源于亲本人肝癌细胞H7402的肝癌转移亚克隆细胞系,并与亲本细胞形成配对关系,为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料;可用于筛选肝癌转移相关基因;可用于筛选肝癌转移相关蛋白;可用于筛选抗肿瘤转移药物;可用于肿瘤转移分子机理的研究;可用于进行肿瘤转移DNA疫苗的研究。

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