公开(公告)号：CN118931957A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202411227625.1

申请日：2024-09-02

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 朱丽华 ,  费琪 ,  杨倩 ,  田振兴 ,  叶建仁

IPC: C12N15/84 ,  A01H4/00

Abstract: 本申请公开了一种低浓度农杆菌介导的湿地松遗传转化方法，涉及植物基因工程技术领域。本申请的低浓度农杆菌介导的湿地松遗传转化方法，采集湿地松球果表面消毒后，取出种子内完整的雌配子体并诱导培养出胚性愈伤组织，以发育至PEMⅢ阶段的湿地松胚性愈伤组织为材料，进行悬浮预培养获得受体材料，使用OD600值为0.3以下的农杆菌侵染液进行侵染，侵染结束后进行共培养、恢复培养、筛选培养、成熟处理后，最终获得转基因的体细胞胚。本方法侵染后的转化效率多达0.71块/g，且阳性率不低于42.86％，说明该体系稳定且效率较高，为湿地松的基因功能和品质改良研究提供技术支持，同时为培育高产、高抗的湿地松新品种奠定基础。

公开(公告)号：CN119265234A

公开(公告)日：2025-01-07

申请号：CN202411220970.2

申请日：2024-09-02

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 朱丽华 ,  杨倩 ,  费琪 ,  季昕艺 ,  叶建仁

IPC: C12N15/84 ,  A01H6/00

Abstract: 本申请公开了一种根癌农杆菌介导的马尾松遗传转化体系的构建方法，属于基因工程技术领域。本申请根癌农杆菌介导的马尾松遗传转化体系的构建方法，采集马尾松未成熟球果并诱导培养出胚性愈伤组织，以处于PEM III阶段的马尾松胚性愈伤组织为材料，进行悬浮预培养获得受体材料，再采用OD600值为0.2‑0.6的农杆菌侵染液进行侵染后经共培养、恢复培养和筛选培养，采用GUS进行组织化学染色并进行分子鉴定，获得转基因胚性愈伤组织，再经过成熟处理，最终获得转基因体细胞胚。本发明建立的马尾松遗传转化体系，转化性能稳定且转化阳性率高，当受体材料是基因型为1‑3‑5的马尾松胚性愈伤组织时，转化阳性率高达100％。