公开(公告)号：CN117589848A

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202311545520.6

申请日：2023-11-20

Applicant: 南京师范大学

Inventor： 李卉卉 ,  李淑贤 ,  孙畅 ,  陈大勇

IPC: G01N27/447 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法，即一种测定主客体间结合常数的压力驱动亲和毛细管电泳方法，以药物分子可的松作为中性标记物，并构建合适的毛细管电泳分离条件，对细胞色素C与适配体的结合进行了测定，通过粘度校正的方法可以准确获得含有不同浓度细胞色素C电泳缓冲液中适配体的有效迁移率，并由此确定结合常数。本发明的方法分析时间短，可有效消除毛细管内温度不均一对迁移率的影响，减小了高电压下缓冲液电解质解离现象的发生，选用药物分子作为中性标记物，降低了常见有机中性标记物对适配体疏水作用的影响。本发明测定细胞色素C与适配体结合常数方法操作简单、测定速度快且准确性好。

公开(公告)号：CN117589849A

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202311561959.8

申请日：2023-11-22

Applicant: 南京师范大学

Inventor： 李卉卉 ,  孙畅 ,  李淑贤 ,  陈大勇

IPC: G01N27/447 ,  G01N33/53 ,  C12N15/115

Abstract: 本发明公开了一种基于毛细管电泳技术测定适配体与小分子靶标间相互作用的方法，包括适配体水溶液的配制；小分子靶标储备液的配制；电泳缓冲液的配制；HPC中性涂层的毛细管的制备；标准曲线的绘制；适配体与小分子靶标混合溶液的毛细管电泳前沿分析；测定适配体与小分子靶标的结合常数，进而确定特异性结合的结合常数。本发明提供的方法操作简便，准确度高，灵敏度高，重现性好，有望用于其他霉素及药物分子的检测与相互作用研究，进一步拓展了DNA适配体在生物分析领域的应用。