一种基于Cu-MOF的CA125检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN111855625B

    公开(公告)日:2022-11-04

    申请号:CN201911214559.3

    申请日:2019-12-02

    Abstract: 本发明属于分子生物学及核酸化学技术领域,涉及基于Cu‑MOF的CA125检测试剂盒及其应用。该试剂盒是基于利用金属有机骨架材料的荧光淬灭效应及金属MOF与DNA适体较强的吸附力,当DNA适体与MOF共同存在时,DNA适体与MOF结合,荧光淬灭;而当目标蛋白存在的情况下,DNA适体优先与目标蛋白结合或将DNA适体从MOF上置换下来,荧光值恢复。合成特异性针对CA125的DNA适体,加上Cy5.5的荧光标记,序列为:TGCCTTATTACTCTCTCCTGTTAAC‑Cy5.5。利用不同浓度的标准蛋白和DNA适体及MOF共孵育,获得荧光恢复标准曲线,优化反应体系,获得最优检测范围与检测灵敏度,利用不同蛋白标准曲线及检测体系中不同荧光值目标蛋白恢复情况,获得不同目标蛋白浓度。该检测方法快速、低成本、高灵敏、不需复杂的扩增和检测仪器。

    一种一步法同时检测miR-486、miR-146b和miR-15b的方法及其应用

    公开(公告)号:CN108982439A

    公开(公告)日:2018-12-11

    申请号:CN201810586721.3

    申请日:2018-06-07

    Abstract: 本发明公开了一种miR-486、miR-146b和miR-15b探针设计方法,所述具体方法步骤如下:步骤一:设计茎环-miR-486序列为SH-(CH2)6-AAA AAC TCG GGG CAG CTC AGT ACA GGA TTT TT-6-FAM。本发明通过设计三种茎环结构3′端修饰了不同荧光分子,FAM修饰茎环-miR-486,Cy5修饰茎环-miR-146b,Cy3修饰茎环-miR-15b,5′端通过金-巯键修饰到金纳米表面,由于茎环的特殊结构,荧光分子将与金纳米表面接触,荧光猝灭,当目标miRNA存在,由于碱基互补配对,打开茎环结构,使得荧光信号分子远离金纳米表面,从而可检测到相应荧光信号大大增加,实现了对转录因子三种miRNA的快速同时检测,具有良好的灵敏度和特异性。

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