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公开(公告)号:CN104730067A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510113372.X
申请日:2015-03-16
Applicant: 南京工业大学
IPC: G01N21/76
Abstract: 本发明提供一种磷脂的电致化学发光检测方法,包括如下步骤:(1)将待检测磷脂浸泡在低离子强度溶液中使磷脂活化,然后将活化后的磷脂用磷酸缓冲液冲洗并浸泡待用;(2)将经步骤(1)处理后的待检测磷脂浸入含有鲁米诺或L012的磷酸缓冲液中,以ITO为工作电极,Ag/AgCl、Pt分别为参比电极和对电极,利用电致化学发光法检测发光强度I0,然后向其中加入磷脂酶D和胆碱氧化酶的混合溶液,反应l~2min以后,再次检测发光强度I1,计算加入磷脂酶D和胆碱氧化酶的混合溶液前后发光强度的变化I1/I0。本发明的方法可用于测定细胞表面磷脂,同时还可以测定单个细胞表面磷脂,检测灵敏度高、专一性好。
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公开(公告)号:CN104730067B
公开(公告)日:2017-08-22
申请号:CN201510113372.X
申请日:2015-03-16
Applicant: 南京工业大学
IPC: G01N21/76
Abstract: 本发明提供一种磷脂的电致化学发光检测方法,包括如下步骤:(1)将待检测磷脂浸泡在低离子强度溶液中使磷脂活化,然后将活化后的磷脂用磷酸缓冲液冲洗并浸泡待用;(2)将经步骤(1)处理后的待检测磷脂浸入含有鲁米诺或L012的磷酸缓冲液中,以ITO为工作电极,Ag/AgCl、Pt分别为参比电极和对电极,利用电致化学发光法检测发光强度I0,然后向其中加入磷脂酶D和胆碱氧化酶的混合溶液,反应l~2min以后,再次检测发光强度I1,计算加入磷脂酶D和胆碱氧化酶的混合溶液前后发光强度的变化I1/I0。本发明的方法可用于测定细胞表面磷脂,同时还可以测定单个细胞表面磷脂,检测灵敏度高、专一性好。
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公开(公告)号:CN103063597A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201310007386.4
申请日:2013-01-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种检测脂肪酶活性的方法,其利用了巯基乙酸甲酯修饰纳米金,在脂肪酶存在下,水解成巯基乙酸,从而暴露出羧酸根,而羧酸根之间存在强烈的氢键作用,从而拉近了纳米金之间的距离,使纳米金聚集变蓝。一方面可以从颜色上肉眼直接识别脂肪酶活性的强弱,另一方面,通过紫外可见分光光度计灵敏地检测脂肪酶的活性。本发明从时间、温度、量等方面对脂肪酶的活性做了检测,实验现象明显。本发明操作简单,底物无需乳化,用量少,有利于肉眼观察明显,成本低廉。不仅在学术上有很好的研究价值,在生产应用上也有广阔的前景。
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公开(公告)号:CN103063597B
公开(公告)日:2014-12-31
申请号:CN201310007386.4
申请日:2013-01-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种检测脂肪酶活性的方法,其利用了巯基乙酸甲酯修饰纳米金,在脂肪酶存在下,水解成巯基乙酸,从而暴露出羧酸根,而羧酸根之间存在强烈的氢键作用,从而拉近了纳米金之间的距离,使纳米金聚集变蓝。一方面可以从颜色上肉眼直接识别脂肪酶活性的强弱,另一方面,通过紫外可见分光光度计灵敏地检测脂肪酶的活性。本发明从时间、温度、量等方面对脂肪酶的活性做了检测,实验现象明显。本发明操作简单,底物无需乳化,用量少,有利于肉眼观察明显,成本低廉。不仅在学术上有很好的研究价值,在生产应用上也有广阔的前景。
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