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公开(公告)号：CN101081182A
公开(公告)日：2007-12-05
申请号：CN200710024892.9
申请日：2007-07-05
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
Abstract: 本发明涉及一种新型生物人工肝细胞反应器。本发明在于在反应器的透明聚丙烯外壳中设置壳聚糖纳米多孔支架，并在支架中三角形排列进中空纤维氧气管和血浆管。本发明解决了过去存在的肝细胞脱离了机体内的内环境，不易在膜材料上黏附生长，功能表达也相应降低，作为高氧耗的细胞肝细胞在反应器中必须至少达到1010的数量级才能达到理想的效果，导致在反应器外部附加一个氧供设备，应用不方便，效果也不理想等缺陷。本发明将壳聚糖纳米多孔支架引入反应器内，通过模拟细胞在体内的微环境，为肝细胞的黏附和生长提供一个良好的环境。同时，它还间隔选取反应器中的中空纤维管作为专门的氧气供应管道，为生物人工肝带来明显的有益效果。
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公开(公告)号：CN101455864B
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN200810243330.8
申请日：2008-12-26
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: A61M1/14
Abstract: 本发明涉及一种暂时替代人体肝脏功能的混合型生物人工肝体外支持装置。本发明结构是培养箱内的生物反应器接反应器循环泵、膜肺，膜肺接交换柱，交换柱接反应器循环泵，血泵接血液入口、分离管，血浆灌流泵接三通、活性炭吸附柱，生物人工肝泵接活性炭吸附柱、接交换柱，透析泵接交换柱、透析管，分离管接血液池、三通，三通接废弃血浆罐、血浆灌流泵，活性炭吸附柱接生物人工肝泵，透析管接血液池、透析液袋、废弃液罐，血液池接血液出口。本发明解决了非生物人工肝和生物人工肝各自缺陷。本发明使非生物人工肝和生物人工肝有机结合，产生协同作用，达到血浆置换、血浆灌流、生物人工肝和血液透析。
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公开(公告)号：CN101342099A
公开(公告)日：2009-01-14
申请号：CN200810124260.4
申请日：2008-07-04
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
Abstract: 本发明涉及一种新型生物人工肝细胞反应器。本发明技术特征是盖子在外壳上端，培养液出口在外壳下端，二层及二层以上平板重心对称设置，每层平板中间设置圆孔，表面设有二个以上小孔，并在平板表面纺有一层壳聚糖纳米纤维支架，平板通过中心圆孔固定在中空支架上，中空支架侧面设置侧孔。本发明解决了现有技术中空纤维型、单层平板型、灌注床型和包被悬浮型生物人工肝细胞反应器存在的各自缺陷。本发明增加反应器的有效交换面积，肝脏细胞贴壁培养且使细胞均匀分布，实现营养物质的充分交换，促进肝细胞在细胞支架表面的粘附，从而耐受培养液循环带来的剪切力。
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公开(公告)号：CN105925581A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610457343.X
申请日：2016-06-22
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K48/00 , A61P35/00
CPC classification number: C12N15/113 , A61K31/713 , C12N15/86 , C12N2310/14 , C12N2740/15021 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明属于慢病毒载体制备领域，具体涉及一种人WIPI2‑shRNA慢病毒载体、构建方法与应用，合成针对RNA干扰靶点序列的DNA oligo的正链和反链；所述的正链和反链退火形成带粘性末端的双链DNA；通过酶切使慢病毒载体线性化，使线性化载体与步骤（1）得到的双链DNA连接；将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞，对得到的阳性克隆进行PCR鉴定；质粒抽提，用于下一步病毒包装。本发明构建的人WIPI2‑shRNA慢病毒载体，将载体质粒转染后得到包装并浓缩的病毒，病毒再侵染目的细胞，实现了WIPI2基因干扰，降低WIPI2基因的表达，降低被病毒侵袭的细胞生长速率，提高被病毒侵袭的细胞凋亡率。
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公开(公告)号：CN101342099B
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN200810124260.4
申请日：2008-07-04
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
Abstract: 本发明涉及一种新型生物人工肝细胞反应器。本发明技术特征是盖子在外壳上端，培养液出口在外壳下端，二层及二层以上平板重心对称设置，每层平板中间设置圆孔，表面设有二个以上小孔，并在平板表面纺有一层壳聚糖纳米纤维支架，平板通过中心圆孔固定在中空支架上，中空支架侧面设置侧孔。本发明解决了现有技术中空纤维型、单层平板型、灌注床型和包被悬浮型生物人工肝细胞反应器存在的各自缺陷。本发明增加反应器的有效交换面积，肝脏细胞贴壁培养且使细胞均匀分布，实现营养物质的充分交换，促进肝细胞在细胞支架表面的粘附，从而耐受培养液循环带来的剪切力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102218161A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201010591170.3
申请日：2010-12-16
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: A61L27/38 , C12N5/071 , C12N5/0775 , A61M1/34
Abstract: 本发明涉及一种猪肝细胞与骨髓间充质干细胞共微囊化内置生物人工肝方法。本发明先建立猪骨髓间充质干细胞体外培养扩增体系，再采用两步胶原酶法原位灌注分离猪原代肝细胞，然后藻酸盐-聚左旋赖氨酸制备微囊包被肝细胞和骨髓间充质干细胞。本发明克服了内置细胞通常无法长期存活，增殖能力极度有限，输注的肝细胞产生各种促肝再生刺激因子的功能也随之受到抑制等缺陷。本发明将骨髓间充质干细胞引入内置生物人工肝系统，通过异质细胞间相互作用，充分模拟肝细胞在体微环境，有效延长肝细胞的生存时间，促进肝细胞增殖分化，并保持肝细胞特有的生物学功能，从而显著改善内置生物人工肝治疗肝功能衰竭的治疗效果。
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公开(公告)号：CN101524629B
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN200910029377.9
申请日：2009-04-10
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: B01J13/02
Abstract: 本发明涉及一种生物人工反应装置中的两步微囊制备方法。本发明技术方案是选取生物细胞材料充分混匀于2％海藻酸钠溶液中，其混悬液由喷气式微囊发生器进入微囊发生器内，喷入氯化钙溶液内，与多聚赖氨酸溶液反应后，再与海藻酸钠溶液反应后，得微囊，将上微囊与海藻酸钠溶液充分混匀，通过喷气式微囊发生器重复上述步骤，用柠檬酸钠溶液液化微囊核心后，得微囊。本发明解决了现有一次微囊存在的使一些细胞材料嵌顿在微囊的囊膜间，从而引起免疫分子的攻击，使微囊密封性遭到破坏的缺陷。本发明两步微囊化得到的微囊具有更强的机械张力，在高剪切力的冲击下仍保持囊壁完整性，降低细胞材料的溢出率，免疫隔离作用的发挥避免了微囊完整性遭到破坏。
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公开(公告)号：CN101524629A
公开(公告)日：2009-09-09
申请号：CN200910029377.9
申请日：2009-04-10
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: B01J13/02
Abstract: 本发明涉及一种生物人工反应装置中的两步微囊制备方法。本发明技术方案是选取生物细胞材料充分混匀于2％海藻酸钠溶液中，其混悬液由喷气式微囊发生器进入微囊发生器内，喷入氯化钙溶液内，与多聚赖氨酸溶液反应后，再与海藻酸钠溶液反应后，得微囊，将上微囊与海藻酸钠溶液充分混匀，通过喷气式微囊发生器重复上述步骤，用柠檬酸钠溶液液化微囊核心后，得微囊。本发明解决了现有一次微囊存在的使一些细胞材料嵌顿在微囊的囊膜间，从而引起免疫分子的攻击，使微囊密封性遭到破坏的缺陷。本发明两步微囊化得到的微囊具有更强的机械张力，在高剪切力的冲击下仍保持囊壁完整性，降低细胞材料的溢出率，免疫隔离作用的发挥避免了微囊完整性遭到破坏。
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公开(公告)号：CN101455864A
公开(公告)日：2009-06-17
申请号：CN200810243330.8
申请日：2008-12-26
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: A61M1/14
Abstract: 本发明涉及一种暂时替代人体肝脏功能的混合型生物人工肝体外支持装置。本发明结构是培养箱内的生物反应器接反应器循环泵、膜肺，膜肺接交换柱，交换柱接反应器循环泵，血泵接血液入口、分离管，血浆灌流泵接三通、活性炭吸附柱，生物人工肝泵接活性炭吸附柱、接交换柱，透析泵接交换柱、透析管，分离管接血液池、三通，三通接废弃血浆罐、血浆灌流泵，活性炭吸附柱接生物人工肝泵，透析管接血液池、透析液袋、废弃液罐，血液池接血液出口。本发明解决了非生物人工肝和生物人工肝各自缺陷。本发明使非生物人工肝和生物人工肝有机结合，产生协同作用，达到血浆置换、血浆灌流、生物人工肝和血液透析。
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公开(公告)号：CN201320317Y
公开(公告)日：2009-10-07
申请号：CN200820238139.X
申请日：2008-12-26
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: A61M1/00
Abstract: 本实用新型涉及一种暂时替代人体肝脏功能的混合型生物人工肝体外支持装置。本实用新型结构是培养箱内的生物反应器接反应器循环泵、膜肺，膜肺接交换柱，交换柱接反应器循环泵，血泵接血液入口、分离管，血浆灌流泵接三通、活性炭吸附柱，生物人工肝泵接活性炭吸附柱、接交换柱，透析泵接交换柱、透析管，分离管接血液池、三通，三通接废弃血浆罐、血浆灌流泵，活性炭吸附柱接生物人工肝泵，透析管接血液池、透析液袋、废弃液罐，血液池接血液出口。本实用新型解决了非生物人工肝和生物人工肝各自缺陷。本实用新型使非生物人工肝和生物人工肝有机结合，产生协同作用，达到血浆置换、血浆灌流、生物人工肝和血液透析。
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