一种人源化细胞、动物模型及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN117866900A

    公开(公告)日:2024-04-12

    申请号:CN202311310625.3

    申请日:2023-10-10

    Inventor: 李颜 刘威 汪慧怡

    Abstract: 本发明提供了一种基因修饰的小鼠细胞,包含该小鼠细胞的具有人源化免疫系统的小鼠以该人源化小鼠的构建方法。该方法包括,在小鼠上失活Gfi1基因,其后不经亚致死性辐照,通过注射造血干细胞直接进行人源化建模过程,其中造血干细胞的剂量可减少为原参考剂量的八分之一,因此大幅减少了造血干细胞的使用剂量。通过上述方法,不仅降低了人源化小鼠模型的构建成本,简化了构建步骤,缩短了构建时间,同时免辐照也解决了目前实验小鼠抗辐照能力弱的问题,降低了小鼠感染的风险,并在小鼠中重建出包括人源中性粒细胞在内的多种免疫亚群,为临床前研究提供了更好的小鼠模型。

    一种DLL4人源化小鼠模型的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116716349B

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202310958263.2

    申请日:2023-08-01

    Abstract: 本发明涉及一种DLL4人源化小鼠模型的构建方法,该构建方法:(1)构建表达人源化DLL4的打靶载体;(2)设计并获得针对小鼠Dll4基因Exon1至Exon9部分的sgRNA;(3)将打靶载体、sgRNA以及Cas9蛋白共注射或共电转至小鼠受精卵细胞质或细胞核中,并将该受精卵移植至假孕小鼠,对假孕生仔鼠进行基因型鉴定,筛选成功插入正确人源片段的阳性F0小鼠;(4)F0小鼠与背景鼠配种繁殖获得F1小鼠,筛选出DLL4人源化小鼠模型。本发明构建的DLL4人源化小鼠在肿瘤学、免疫学等领域具有应用价值。

    一种SEMA4D人源化小鼠模型的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116949097B

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311212328.5

    申请日:2023-09-20

    Abstract: 本发明涉及一种SEMA4D人源化小鼠模型的构建方法,该构建方法:(1)构建表达人源化SEMA4D基因的打靶载体;(2)设计并获得针对小鼠Sema4d基因的sgRNA;(3)将打靶载体、sgRNA以及Cas9蛋白共注射或共电转至小鼠受精卵细胞质或细胞核中,并将该受精卵移植至假孕小鼠,对假孕生仔鼠进行基因型鉴定,筛选成功插入正确人源片段的阳性F0小鼠;(4)F0小鼠与背景鼠配繁获得F1小鼠,筛选出SEMA4D人源化小鼠模(56)对比文件Chen W等.Knocking Out SST Gene ofBGC823 Gastric Cancer Cell by CRISPR/Cas9Enhances Migration, Invasion andExpression of SEMA5A and KLF2《.CancerManagement and Research》.2020,第12卷第1313-1321页.Fisher TL等.Generation andpreclinical characterization of anantibody specific for SEMA4D《.MABS》.2016,第8卷(第1期),第150-162页.刘晓辉;卢穹宇;朱鹏飞;杨飞;汤晓蓉;朱力.敲除Sema4D导致血小板功能缺陷并使心肌缺血梗死面积减小.中国动脉硬化杂志.2011,(第03期),全文.

    一种DLL4人源化小鼠模型的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116716349A

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202310958263.2

    申请日:2023-08-01

    Abstract: 本发明涉及一种DLL4人源化小鼠模型的构建方法,该构建方法:(1)构建表达人源化DLL4的打靶载体;(2)设计并获得针对小鼠Dll4基因Exon1至Exon9部分的sgRNA;(3)将打靶载体、sgRNA以及Cas9蛋白共注射或共电转至小鼠受精卵细胞质或细胞核中,并将该受精卵移植至假孕小鼠,对假孕生仔鼠进行基因型鉴定,筛选成功插入正确人源片段的阳性F0小鼠;(4)F0小鼠与背景鼠配种繁殖获得F1小鼠,筛选出DLL4人源化小鼠模型。本发明构建的DLL4人源化小鼠在肿瘤学、免疫学等领域具有应用价值。

Patent Agency Ranking