公开(公告)号：CN110484637B

公开(公告)日：2020-06-09

申请号：CN201910887484.9

申请日：2019-09-19

Applicant: 南京大学

Inventor： 何席伟 ,  张徐祥 ,  高洁 ,  齐昭栋

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6848 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种水体粪便污染检测的引物、试剂盒及高通量溯源方法，检测范围涵盖人类、畜禽类及多种野生动物类粪便污染，属于水体污染检测领域。其主要包括以下步骤：提取待测水样DNA；利用两对扩增线粒体DNA的通用引物对水样DNA进行巢式PCR扩增；将扩增产物进行高通量测序；将测序数据与线粒体DNA数据库进行比对注释，基于比对结果确定水样中存在的粪便污染来源。本发明利用巢式PCR技术对水样中指示粪便污染的线粒体DNA进行扩增，具有极高的灵敏性，采用本发明的通用引物结合高通量测序，不仅能够同时对多种潜在粪便污染进行定性溯源，还能对各类粪便污染的程度进行相对定量，从而确定主要污染源。

公开(公告)号：CN110484637A

公开(公告)日：2019-11-22

申请号：CN201910887484.9

申请日：2019-09-19

Applicant: 南京大学

Inventor： 何席伟 ,  张徐祥 ,  高洁 ,  齐昭栋

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6848 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种水体粪便污染检测的引物、试剂盒及高通量溯源方法，检测范围涵盖人类、畜禽类及多种野生动物类粪便污染，属于水体污染检测领域。其主要包括以下步骤：提取待测水样DNA；利用两对扩增线粒体DNA的通用引物对水样DNA进行巢式PCR扩增；将扩增产物进行高通量测序；将测序数据与线粒体DNA数据库进行比对注释，基于比对结果确定水样中存在的粪便污染来源。本发明利用巢式PCR技术对水样中指示粪便污染的线粒体DNA进行扩增，具有极高的灵敏性，采用本发明的通用引物结合高通量测序，不仅能够同时对多种潜在粪便污染进行定性溯源，还能对各类粪便污染的程度进行相对定量，从而确定主要污染源。