公开(公告)号：CN107189986A

公开(公告)日：2017-09-22

申请号：CN201710616052.5

申请日：2017-07-25

Applicant: 南京大学

Inventor： 吴兵 ,  虞悦 ,  陈慧梅 ,  刘苏 ,  张徐祥 ,  任洪强

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/42

Abstract: 本发明公开了一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法，该方法选用与内质网应激相关的CHOP基因作为特异性诱导基因构建CHOP启动子，再将CHOP启动子与便于检测的SEAP基因连接，构建慢病毒CHOP‑SEAP质粒载体；最后将CHOP‑SEAP质粒转染至Hela细胞中。本发明还公开了上述基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法构建的报告基因细胞株的应用。本发明方法构建的报告基因细胞株能够指示早期细胞毒性损伤，大大提高细胞株的检测敏感性和降低检测限值，从而表征毒害污染物的早期毒性，且适用于大多数毒害污染物；同时还可表征实际水体的综合毒性。细胞株选用的报告基因SEAP基因具有便于检测、可动态监测的优点。

公开(公告)号：CN107189986B

公开(公告)日：2020-08-11

申请号：CN201710616052.5

申请日：2017-07-25

Applicant: 南京大学

Inventor： 吴兵 ,  虞悦 ,  陈慧梅 ,  刘苏 ,  张徐祥 ,  任洪强

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/42

Abstract: 本发明公开了一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法，该方法选用与内质网应激相关的CHOP基因作为特异性诱导基因构建CHOP启动子，再将CHOP启动子与便于检测的SEAP基因连接，构建慢病毒CHOP‑SEAP质粒载体；最后将CHOP‑SEAP质粒转染至Hela细胞中。本发明还公开了上述基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法构建的报告基因细胞株的应用。本发明方法构建的报告基因细胞株能够指示早期细胞毒性损伤，大大提高细胞株的检测敏感性和降低检测限值，从而表征毒害污染物的早期毒性，且适用于大多数毒害污染物；同时还可表征实际水体的综合毒性。细胞株选用的报告基因SEAP基因具有便于检测、可动态监测的优点。