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公开(公告)号：CN111912892B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201910375230.9
申请日：2019-05-07
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开了一种气单胞菌溶素纳米孔通道在生物磷酸化及相关酶分析中的应用。具体为构建气单胞菌溶素纳米孔通道，并在构建的气单胞菌溶素纳米孔通道的两端施加电压，将待测物或待测物相关探针分子加入检测池的一端，在电压的驱动下待测物穿过气单胞菌溶素纳米孔产生阻断电流信号及阻断电流时间，通过对阻断电流信号及阻断电流时间进行比较分析，获得待测分子相应的检测信息。本发明公开了气单胞菌溶素纳米孔通道的新用途，可以将其用于核酸、多肽、蛋白的磷酸化检测分析，不需要DNA马达蛋白，灵敏度高，检测方便，且可进一步实现对激酶、磷酸酶、酶抑制剂等多种酶的活性分析和定量分析，并可实现酶活的实时监测。
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公开(公告)号：CN111912892A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN201910375230.9
申请日：2019-05-07
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开了一种气单胞菌溶素纳米孔通道在生物磷酸化及相关酶分析中的应用。具体为构建气单胞菌溶素纳米孔通道，并在构建的气单胞菌溶素纳米孔通道的两端施加电压，将待测物或待测物相关探针分子加入检测池的一端，在电压的驱动下待测物穿过气单胞菌溶素纳米孔产生阻断电流信号及阻断电流时间，通过对阻断电流信号及阻断电流时间进行比较分析，获得待测分子相应的检测信息。本发明公开了气单胞菌溶素纳米孔通道的新用途，可以将其用于核酸、多肽、蛋白的磷酸化检测分析，不需要DNA马达蛋白，灵敏度高，检测方便，且可进一步实现对激酶、磷酸酶、酶抑制剂等多种酶的活性分析和定量分析，并可实现酶活的实时监测。
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公开(公告)号：CN112578106B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202011169556.5
申请日：2020-10-28
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/487 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种纳米孔道单分子蛋白质测序仪，主要包括纳米孔道阵列化芯片系统、微电流检测系统以及数据处理与构建系统三部分；芯片主要包括氨基酸电性筛选芯片以及基于特异性纳米孔道的氨基酸序列读取芯片等，其设计原理是根据氨基酸的亲疏水性、极性、带电性等性质，设计系列具有氨基酸靶向识别的生物纳米孔道，逐一获得组成待测蛋白质的氨基酸的纳米孔道特征离子流信号；通过阵列化微电流测量系统，实现对每一个纳米孔道内蛋白质序列特征信息获取；进而，利用标准纳米孔道模型肽序列信息库进行氨基酸序列识别、校正、整合与读取，能够实现单个氨基酸的超高分辨，满足蛋白质测序的技术要求。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112500459A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011168149.2
申请日：2020-10-28
Applicant: 南京大学
IPC: C07K14/28 , C12Q1/6869 , G01N33/487
Abstract: 本发明提供了一种Aerolysin突变纳米孔孔以及Aerolysin突变纳米孔在分子生物检测方面的应用，Aerolysin突变纳米孔由Aerolysin突变单体组成，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，且所述突变Aerolysin单体包含以下任意一个或其任意组合中相应位置氨基酸的取代：K238Q/C/E/G/N/R/F/Y、R288D、D222R、N226Q/S228K/G270D、T232L/N226Q/S228K、T274L/N226Q/S228K、T230G/T232K/K238Q、S236C、S272K/N226W/G270F/E258H、N262S/S264Q/Q268T、S264Q、G270Q、S272Q、T274C、S278C、S276Y/C、S276C/S278C、T274L/N226Q/G270K,T274Q/N226Q/G270K、T210A，R104D，R397D、N226Q/S228K、N226Q/G270K、S228K/T232K/K238Q中。由上述突变单体组装成的纳米孔具有增强检测和表征分析物的能力，如DNA序列的长度和碱基种类。特定来说，使寡聚核苷酸穿过纳米孔的速度降低了两个数量级以上。可以选择性地使混合物中的特定的分子穿过纳米孔。
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公开(公告)号：CN117110405A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202310051967.1
申请日：2023-02-02
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/416 , G01N33/487 , G01N27/30
Abstract: 本发明提供了一种纳米孔道检测装置，以及使用该装置对生物样品进行检测的方法和用途。所述纳米孔道检测装置包括具有开孔的绝缘体、位于所述开孔中的磷脂膜或聚合物膜、由突变型气单胞菌溶素形成的穿过所述磷脂膜或聚合物膜的纳米孔道、分别位于绝缘体两侧的腔室、腔室中容纳的电解液、以及设置在腔室中的检测器。本申请开发的纳米孔道技术能够实现对一种或多种样品——例如一种或多种血管紧张素多肽——有效地进行定性或快速定量检测，并且在分辨率、灵敏度、捕获效率和基质兼容性等方面实现显著的改进。本申请开发的纳米孔道技术还能实现对一种或多种样品——例如一种或多种血管紧张素多肽———的动态变化进行实时定量监测。
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公开(公告)号：CN112578106A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011169556.5
申请日：2020-10-28
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/487 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种纳米孔道单分子蛋白质测序仪，主要包括纳米孔道阵列化芯片系统、微电流检测系统以及数据处理与构建系统三部分；芯片主要包括氨基酸电性筛选芯片以及基于特异性纳米孔道的氨基酸序列读取芯片等，其设计原理是根据氨基酸的亲疏水性、极性、带电性等性质，设计系列具有氨基酸靶向识别的生物纳米孔道，逐一获得组成待测蛋白质的氨基酸的纳米孔道特征离子流信号；通过阵列化微电流测量系统，实现对每一个纳米孔道内蛋白质序列特征信息获取；进而，利用标准纳米孔道模型肽序列信息库进行氨基酸序列识别、校正、整合与读取，能够实现单个氨基酸的超高分辨，满足蛋白质测序的技术要求。
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公开(公告)号：CN118518715A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202310130840.9
申请日：2023-02-17
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/00
Abstract: 本发明涉及一种混合物样品中单个样品的定量方法，包括：1)基于纳米孔道定量检测方法分别获取已知浓度的单独A组分的捕获率以及混合物样品中已知浓度的A组分的捕获率；2)对捕获率的获取方式进行校准；3)采用经校准后的获取方式获取混合物样品中A组分在不同浓度下的捕获率，获取混合物样品中A组分的浓度与捕获率的关系；4)获取混合物样品中所有组分的浓度与捕获率的标准曲线；5)基于标准曲线对混合物样品中未知浓度的某个单个样品进行定量。本发明相较于已报道的混合物样品定量方式既排除了一个分子进孔时对其它分子进孔效率的影响，也无需较多的测量时间和目标事件数量来保证方法的准确性。
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公开(公告)号：CN112500459B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202011168149.2
申请日：2020-10-28
Applicant: 南京大学
IPC: C07K14/28 , C12Q1/6869 , G01N33/487
Abstract: 本发明提供了一种Aerolysin突变纳米孔孔以及Aerolysin突变纳米孔在分子生物检测方面的应用，Aerolysin突变纳米孔由Aerolysin突变单体组成，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，由各突变单体组装成的纳米孔具有增强检测和表征分析物的能力，如DNA序列的长度和碱基种类。特定来说，使寡聚核苷酸穿过纳米孔的速度降低了两个数量级以上。可以选择性地使混合物中的特定的分子穿过纳米孔。
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