公开(公告)号：CN110873745A

公开(公告)日：2020-03-10

申请号：CN201811053636.7

申请日：2018-09-04

Applicant: 南京大学

Inventor： 李根喜 ,  木朝丽 ,  支君

IPC: G01N27/327

Abstract: 一种检测急性髓性白血病标志物Siglec-5的新方法。原理如下：在本发明工作中，我们基于DNA发夹结构和核酸适配体构建了新型的电化学生物传感器，用于检测急性髓性白血病标志物Siglec-5。我们在所设计的DNA发夹结构的5’-末端修饰了巯基-SH，使得该发夹结构可以通过Au-S键修饰在金电极表面；同时，在3’-末端修饰了亚甲基蓝MB，由于发夹结构的特性，3’-端的MB靠近电极表面，因此能检测得到较大的MB信号。在实验过程中，Siglec-5适体首先与连接在金电极表面的DNA发夹结构相结合，发夹结构被打开，MB远离电极表面，此时得到的MB信号减弱；然而当检测体系中存在Siglec-5时，由于亲和力的不同，Siglec-5适体与Siglec-5相结合，修饰在电极表面的DNA重新形成发夹结构，由此拉进了MB与电极的距离，MB信号由弱变强。所以，通过MB信号的变化，利用简单的电化学工作站，我们实现了对Siglec-5的高效、灵敏且特异的检测。

公开(公告)号：CN110470712B

公开(公告)日：2021-10-15

申请号：CN201810453521.0

申请日：2018-05-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 李根喜 ,  木朝丽 ,  石榴 ,  高涛 ,  柴雯鑫 ,  焦瑾

IPC: G01N27/327

Abstract: 本发明公开了一种用于检测miRNA的装置原理、即检测条件、最优条件及其应用，其中原理为：在铂片上面放阳极氧化铝薄膜PAA，PAA膜的上面放一个聚缘垫片防止溶液泄露，垫片上面形成一个圆形的电解池，在电解池中，将铂电极作为对电极，甘汞电极作为参比电极，铂片作为工作电极，形成三电极体系，在PAA孔道中修饰与miRNA互补的ssDNA，靶标的下面部分可以与之互补，再加入事先合成好的含有互补的发夹结构(带有primer)的DNA滚环链c‑DNA，然后加入DNA聚合酶便可实现滚环扩增，形成DNA纳米花，从而使通道的空间位阻减少，而在电解池中的[Fe(CN)6]3‑离子流入工作电极的速率变小，电流减小。根据电流的变化量来表征miRNA的浓度，用来检测肿瘤标注物miR‑21。

公开(公告)号：CN110470712A

公开(公告)日：2019-11-19

申请号：CN201810453521.0

申请日：2018-05-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 李根喜 ,  木朝丽 ,  石榴 ,  高涛 ,  柴雯鑫 ,  焦瑾

IPC: G01N27/327

Abstract: 本发明公开了一种用于检测miRNA的装置原理、即检测条件、最优条件及其应用，其中原理为：在铂片上面放阳极氧化铝薄膜PAA，PAA膜的上面放一个聚缘垫片防止溶液泄露，垫片上面形成一个圆形的电解池，在电解池中，将铂电极作为对电极，甘汞电极作为参比电极，铂片作为工作电极，形成三电极体系，在PAA孔道中修饰与miRNA互补的ssDNA，靶标的下面部分可以与之互补，再加入事先合成好的含有互补的发夹结构(带有primer)的DNA滚环链c-DNA，然后加入DNA聚合酶便可实现滚环扩增，形成DNA纳米花，从而使通道的空间位阻减少，而在电解池中的[Fe(CN)6]3-离子流入工作电极的速率变小，电流减小。根据电流的变化量来表征miRNA的浓度，用来检测肿瘤标注物miR-21。

公开(公告)号：CN110514629A

公开(公告)日：2019-11-29

申请号：CN201810520196.5

申请日：2018-05-21

Applicant: 南京大学

Inventor： 李根喜 ,  木朝丽 ,  石榴 ,  王北 ,  柴雯鑫 ,  黑爽

IPC: G01N21/64 ,  G01N27/32 ,  G01N27/327

Abstract: 本发明在已制作的细胞生物印迹聚合物膜基础上，进一步对其表观单分子性质和作为传感器机制深入研究。制作出的高保真性的印迹聚合物膜，通过叶酸受体连接Ligprobe后，再经过RCA滚环扩增信号扩增表征，在微观分子程度上印迹聚合物与模板细胞的高度契合；生物印迹能够在纳米尺度上区分靶分析物的总体大小和表面特征，由于纳米尺度的差异，在此基础上生物印迹具有区分微米尺度上相同的细胞的能力，意味着印迹聚合物膜可能用作生物传感器，可应用在基于细胞表面膜蛋白种类差异分离细胞，这种差异可作为基于生物印迹的癌症诊断工具，本研究还制作基于印迹聚合物膜的电化学传感装置，该装置成本低廉，便于操作并可反复使用，在生物传感领域具有十分广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN110514504A

公开(公告)日：2019-11-29

申请号：CN201810519402.0

申请日：2018-05-21

Applicant: 南京大学

Inventor： 李根喜 ,  木朝丽 ,  王北 ,  石榴 ,  支君

IPC: G01N1/30 ,  G01N15/00 ,  G01N15/10 ,  C12Q1/02

Abstract: 一种新型细胞印迹模型的构建与应用。原理如下：本发明工作中，我们利用聚二甲基硅氧烷本体和固化剂，研制出高度保真性的细胞印迹聚合物，细胞印迹产生了“人造受体”，可通过特异性的凹陷结构形状捕获靶细胞。本研究在研制高度保真细胞印迹聚合物时，创新使用通过双醛固定组合处理使细胞失活，其优点有(1)利用醛基交联而使细胞表面硬化；(2)消除活细胞分泌的化学物质，防止干扰细胞印迹形成过程的保真度。同时本研究提供了一个简单廉价的单细胞分离模型，不依靠专业或昂贵的设备，不需要亲和试剂或蛋白抗体，对靶细胞的捕获效率为89％，且高度抗干扰，可为单细胞分析、细胞组织分化及以细胞为基础的临床诊断提供广阔的应用前景。