公开(公告)号：CN114134197A

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN202111501097.0

申请日：2021-12-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 张宴 ,  易珍

IPC: C12Q1/02 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/66

Abstract: 本发明公开了基于荧光素酶报告基因的细胞毒性快速检测方法，包括：(1)构建基于荧光素酶报告基因细胞株；(2)待测样品配置成溶液后加入到培养液中，然后将培养液加入到含有细胞株的培养基中，吸进培养液后，测定荧光素酶活性来检测细胞毒性。细胞株的构建方法，包括：S1：构建fthl29‑pGL6‑TA质粒；S2：fthl29‑pGL6‑TA质粒转染细胞；S3：筛选稳定细胞系。该细胞株在表征污染物毒性、实际水样综合毒性方面的应用。本发明以铁死亡相关基因启动子构建的报告基因细胞株能快速指示早期的细胞毒性，其特异性高、敏感性高，且便于高通量检测；且既适用于大多数毒害污染物的毒性效应检测，表征铁死亡相关细胞毒性，也能用于复杂实际水样的毒性表征。

公开(公告)号：CN114134197B

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202111501097.0

申请日：2021-12-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 张宴 ,  易珍

IPC: C12Q1/02 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/66

Abstract: 本发明公开了基于荧光素酶报告基因的细胞毒性快速检测方法，包括：(1)构建基于荧光素酶报告基因细胞株；(2)待测样品配置成溶液后加入到培养液中，然后将培养液加入到含有细胞株的培养基中，吸进培养液后，测定荧光素酶活性来检测细胞毒性。细胞株的构建方法，包括：S1：构建fthl29‑pGL6‑TA质粒；S2：fthl29‑pGL6‑TA质粒转染细胞；S3：筛选稳定细胞系。该细胞株在表征污染物毒性、实际水样综合毒性方面的应用。本发明以铁死亡相关基因启动子构建的报告基因细胞株能快速指示早期的细胞毒性，其特异性高、敏感性高，且便于高通量检测；且既适用于大多数毒害污染物的毒性效应检测，表征铁死亡相关细胞毒性，也能用于复杂实际水样的毒性表征。